流式细胞仪常用技术方法.doc

潍坊医学院医学研究实验中心

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细胞周期/DNA分析（PI法）

一、鞘液准备（至少3LPBS，提前一天准备）

0.01M的PBS配制方法：800ml蒸馏水中溶解NaCl8.0g；KCl0.2g；Na2HPO40.24g；调节pH到7.2-7.4（用HCl或NaOH调节，各地蒸馏水的酸碱度不同），加蒸馏水定容至1L，0.22um

二、制备一个阴性对照来设定流式细胞仪的取样参数和十字门的范围：

没有染色的细胞（制备过程如下，仅不加抗体）

三、实验步骤

1.取对数期生长细胞，倒去培养液，胰酶适度消化细胞，用培养液吹打，1000rp