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水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定多管发酵法

水质安全是公共卫生领域关注的核心议题之一，其中微生物污染状况直接关系到人群健康。总大肠菌群和粪大肠菌群作为评估水体受粪便污染程度和潜在肠道致病菌风险的重要指示微生物，其准确检测具有至关重要的意义。多管发酵法作为测定这两类菌群的经典方法，因其操作简便、成本适中且具有良好的重现性，在国内外水质监测工作中得到了广泛应用。本文将详细阐述如何运用多管发酵法测定水中的总大肠菌群和粪大肠菌群，旨在为相关检测人员提供专业、严谨且实用的操作指引。

一、方法原理

多管发酵法基于大肠菌群在特定培养条件下能分解乳糖产酸产气的生理特性，通过将水样接种到一系列含有选择性培养基的试管中，经过不同温度和时间的培养，观察产气情况，并结合平板分离和复发酵试验进行证实，最终根据阳性管数查MPN（最大可能数）表，得出水样中总大肠菌群和粪大肠菌群的浓度。

总大肠菌群的测定通常包括初发酵、平板分离和复发酵三个步骤。初发酵利用乳糖蛋白胨培养液，在适宜温度下培养，观察是否产酸产气，以指示可能存在的总大肠菌群。平板分离则是将初发酵阳性管的培养物转种到固体培养基上，进行菌落形态观察和革兰氏染色，排除非目标菌。复发酵则是将疑似菌落接种回乳糖蛋白胨培养液，再次观察产气情况以确证。

粪大肠菌群（耐热大肠菌群）的测定原理与总大肠菌群类似，但因其更能耐受较高温度，故在初发酵阶段采用更高的培养温度，以