（共12页PPT）第22讲第四章第二节转座子诱变技术.pptVIP

湖南师范大学生命科学学院第22讲转座子诱变技术基因工程第四章基因工程在基因功能研究中的应用湖南师范大学生命科学学院袁婺洲本章目录4.1基因表达谱研究技术4.2基因突变研究技术4.3基因敲除与基因敲减技术4.4基因过表达与异位表达技术4.5基因相互作用研究技术第二节、基因突变研究技术化学诱变转座子诱变一、化学诱变EMS（甲基磺酸乙酯），ENU（N-乙基-N-亚硝基脲）优点：诱变率高随机性强随机饱和诱变EdwardLewis,ChristianeN-V,EricWieschaus5800平衡系4500致死系2600体节发育异常系二、P转座子诱变转座子：转座序列和转座酶基因P转座子诱变上图为天然的P因子，含有两个正常的转座序列IR和转座酶基因。下图为诱变用基因工程改建的P因子。P{lacW}是转座酶基因缺失系，代之以lacZ和mini-white及ampr三个标记基因，转座序列正常。P{Δ2,3}是转座序列突变系，转座酶基因正常。P转座子诱变的优点1、随机插入基因内或增强子区域2、标记基因检测方便3、插入位点容反向PCR克隆4、诱变是可逆的：跳入与跳出P因子跳入与跳出三、PB转座