（共42页PPT）必考题型五　生物工程.pptxVIP

必考题型五生物工程;典型真题?立体解剖;【真题示例】;(1)PCR扩增目的基因时①,需要模板DNA、引物、______________、含Mg2+的缓冲液和耐高DNA聚合酶。DNA聚合酶在PCR的__________步骤中起作用。?

(2)图中标识了载体和S基因中限制酶的切割位点。为将S基因正确插入载体,PCR扩增S基因时需在引物的__________(填“5端”或“3端”)添加限制酶识别序列②,结合上表分析,上游引物应添加的碱基序列是5-__________-3,切割载体时应选用的两种限制酶是__________,PCR扩增产物和载体分别被限制酶切割后,经纯化和连接,获得含S基因的表达载体并导入农杆菌。?;(3)用携带S基因的农杆菌侵染栽培愈伤组织时,基因表达载体中T-DNA③进入愈伤组织细胞,将S基因整合到______________________,抗性基因____________可用于筛选成功转化的愈伤组织④。该愈伤组织经__________形成芽、根,继续培育可获得抗寒能力显著增强的植株。?;【阅卷现场】;【失分警示】

(1)不能理解引物发挥作用的原理,因此不能分析引物的消耗和在引物上连接限制酶识别序列的方法。

(2)不能准确设计重组DNA的操作流程细节,对于限制酶的选择条件也掌握不全,导致无法选择正确的限制酶,对于连接好的重组DNA各组件作用的分析也会出现错误。

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