岗梅磺基转移酶编码基因iasot6的克隆与蛋白表达.docx

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岗梅磺基转移酶编码基因IaSOT6的克隆与蛋白表达

【摘要】目的IaSOT6是由岗梅转录组中筛选出的1个可能编码磺基转移酶(sulfotransferases,SOT)的基因,本实验对其进行克隆和表达,为后续研究岗梅磺化代谢奠定基础。方法提取岗梅根RNA,反转录为cDNA,用RACE技术获得目的基因的全长,连接至载体pEASY;将SOT基因亚克隆至表达载体pET28a,构建重组质粒,在大肠杆菌E.

coli中进行原核表达,用镍亲和层析法纯化蛋白结果获得IaSOT6的完整编码区,长969bp,编码一个322aa的蛋白,蛋白质分子量大小为37.1kDa。S

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