bacillus cereus蛋白酶基因c202103和c202104的克隆及目的蛋白的生物信息学分析.docx

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摘要

本次实验的总DNA模板为蜡样芽孢杆菌，对蛋白酶序列进行生物信息学分析，挑选合适的蛋白酶序列，对酶切位点进行分析，设计引物，将蛋白酶基因C202103与C202104使用PCR技术进行扩增，将目的基因与pHT43质粒双酶切后，共同构建融合表达载体质粒，转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆。使用生物信息学对目的蛋白的理化性质进行分析，实验结果显示：蛋白酶基因C202103并没有成功转入质粒并表达；而C202104则成功表达，筛选出阳性克隆，根据测序结果显示，C202104的基因长度为861bp，与预期相符。