噬菌体RNA环化酶在大肠杆菌与酵母中环状RNA合成研究.pdfVIP

利用源于噬菌体T4

I类内含子的RNA环化酶核酶在细菌和酵

母中合成环状RNA

(剪接/RNA加工/大肠杆菌/酿酒酵母/td)

*

与

小曼努埃尔・阿雷斯†

加州大学圣克鲁兹分校辛斯海默生物系，加利福尼亚州圣克鲁兹市，

95064

由哈里・F・诺勒于1993年12月22日转交

由于难以表达特定序列的环状RNA，关于环状RNA功能及RNA体内拓扑学的

研究受到限制。为解决此问题，噬菌体T4

td的I类内含子在周边环（

L6a）处拆分并重组，使3端半内含子及3剪接位点位于上游，而5剪接位点及5

端半内含子位于单一外显子下游。I类内含子剪接反应将外显子RNA作为环状

分子切除（RNA环化酶核酶活性）。研究表明，外源序列可该外显子并在体

外环化。此类构建体（RNA环化酶核酶）在大肠杆菌和酵母中的表达可导致环状

RNA在这些生物体内积累。在酵母中，RNA环化酶核酶可受调控启动子驱动表达，

其结构类似mRNA——包含5前导区与3尾随区，并携带核内前体mRNA内含子。

RNA环化酶核酶在RNA结构与功能研究领域具有广泛应用前景，包括：RNA

或功能所需的末端条件、RNA拓扑学、反义或核酶调控元件的效能，以及超

长多肽的生物合成