细胞生物学4省公开课一等奖全国示范课微课金奖PPT课件.pptVIP

一、细胞计数及活力测定

二、细胞冻存

三、细胞种玻片（分裂指数用)

四、种MTT所需细胞试验三第1页

一、细胞计数及活力测定（一)原理培养细胞在普通条件下要求有一定密度才能生长良好，所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡细胞，总细胞中活细胞所占百分比叫做细胞活力，由组织中分离细胞普通也要检验活力，以了解分离过程对细胞是否有损伤作用。复苏后细胞也要检验活力，了解冻存和复苏效果。用台盼兰染细胞，死细胞着色，活细胞不着色，从而能够区分死细胞与活细胞。利用细胞内一些酶与特定试剂发生显色反应，也可测定细胞相对数和相对活力。第2页

（二）仪器、用具与试剂1、仪器与用具：普通显微镜、血球计数板、试管、吸管2、试剂：0.4％台盼兰3.材料：细胞悬液附：0.4%台盼兰染液配制台盼兰0.4克加双蒸水至100ml。第3页

（三）操作步骤细胞计数1、将血球计数板及盖片用擦试洁净，并将盖片盖在计数板上。2、将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间。3、静置3分钟。4.镜下观察，计算计数板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方。然后按下式计算：4大格细胞总数细胞数/ml＝