浙江大学细胞培养-基本技术.pptVIP

证明细胞系的种系:人源、鼠源或其他，染色体分析、同工酶分析、DNA指纹技术明确细胞系的组织来源:检测细胞抗原标记的方法细胞是否是正常细胞，有无发生恶性转化:正常细胞二倍体特征，恶性转化细胞为异倍体细胞有无交叉污染:同工酶方法，DNA指纹技术也可以鉴定鉴定细胞系的内容3.细胞培养物的固定、染色培养物的常用固定方法染色方法2.1常用固定方法固定细胞的目的:把组织和细胞的原有结构尽可能完整地保存下来，避免组织和细胞发生降解、自溶、腐败和变形等，使细胞的化学物质和酶能准确定位，使细胞的各部分易于着色、适于观察、长期保存和分析。2.1常用固定方法固定细胞的原则：尽可能选用新鲜培养物，根据检测工具、对象、目的和要求选择固定剂和固定方法。培养物的准备和固定前处理各种细胞培养物。双盖片悬滴和悬液培养物：离心--PBS漂洗2-3次，固定制片;盖片单层培养物：盖片从培养器中取出--PBS漂洗2-3次，固定常用固定液简单固定液:甲醇、乙醇、醋酸、甲醛、戊二醛、丙酮、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、氯化汞、氯化镉、锇酸混合固定液:Mueller固定液、Flernming固定液、FAA固定液、Carnoy固定液、Rossman固定液、Altmann固定液、Bouing固定液常用固定液固定液用途