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2026年生物化学专业实验操作考核题库

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、请根据以下要求完成各项操作或回答问题：

1.配制100mLpH7.4的0.2mol/LTris-HCl缓冲液。请写出计算过程，并列出所需试剂和仪器（包括所需规格）。

2.简述使用移液器准确移取100μl和1mL液体的操作步骤和关键注意事项。

3.在进行蛋白质浓度测定（Bradford法）时，如果标准曲线绘制不理想（如线性范围窄、灵敏度低），可能的原因有哪些？请至少列举三种。

4.请描述SDS电泳分离蛋白质的原理，并简述电泳结束后如何进行蛋白质染色和destaining（脱色）操作。

5.设计一个简单的实验方案，用于检测某种酶的最适反应温度。请写出实验核心步骤，包括如何设置对照组和自变量。

6.在进行酶活力测定时，为什么通常需要使用酶的粗提液而不是纯酶？请说明原因。

7.列出在生物化学实验室操作中必须遵守的至少三项安全规定。

8.解释“竞争性抑制剂”的含义，并简要说明其与酶促反应动力学曲线（Vmax和Km）的关系。

9.从牛血清白蛋白（BSA）溶液中纯化BSA，可以采用哪些层析技术？请分别简述其基本原理。

10.如何判断DNA样品是否被成功提取？请至少提出两种常用的判断方法。

二、请回答以下问题：

11.在