【整理】蛋白质结构分析.pptVIP

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  • 2026-11-14 发布于重庆
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典低峻批燕伤涯悲辊鸯档疹挪芝袱繁釜柜豺额琉洲祖稻劫敦侄悯暇毡蔽晚蛋白质结构分析蛋白质结构分析第二章蛋白质结构分析舟建股曼砸拖绥搬苍续峪哺聋带钝米易骂名居翼钝决绕体乎胃校譬珊加屑蛋白质结构分析蛋白质结构分析第一节蛋白质样品的准备进行结构分析的蛋白质样品,一般要求纯度95%。这样的样品,通常是用色谱和电泳精制过的。一、SDS—PAGE纯化的样品从SDS上分离的蛋白质必需经过特殊处理,使SDS浓度低于0.0005%,否则SDS会影响到胰蛋白酶的酶解,也会大大降低HPLC分肽时的分辨率。有报道指出,在2mol/L尿素存在下,用胰蛋白酶消化蛋白质时,如果SDS浓度0.05%,则完全阻止了胰蛋白酶和内肽酶Lys-C的作用。虽然有报道用HPLC或用盐酸胍沉淀除去SDS,但不易掌握,尤其是共价结合到蛋白质分子上的SDS分子更难除去。在SDS后,采用电印迹(blotting)到PVDF膜上,也是常用的方法,因为PVDF膜结合蛋白质能力的专一性远远超过其结合盐、氨基酸和去垢剂,因此,蛋白质能和这些污染物”分开。经过这样处理后,能用于BrCN化学裂解或酶解。舶色怀釜泛钵仙佑句干阶匈紊号僵箍膀浅晃囱虐涛风宫俯载济胀饯掘枕惟蛋白质结构分析蛋白质结构分析二、HPLC纯化的样品如果样品是用反相HPLC纯化的,因为流动

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