细胞热力学研究方法.pptVIP

显微操作仪细胞热力学研究方法第1页

第二节细胞组分分析方法细胞热力学研究方法第2页

一、离心技术是分离细胞器及各种大分子基本伎俩。转速为10~25kr/min离心机称为高速离心机。转速25kr/min,离心力89Kｇ者称为超速离心机。超速离心机最高转速可达100000r/min,离心力超出500Kg。细胞热力学研究方法第3页

（一)差速离心Differentialcentrifugation特点：介质密度均一;速度由低向高，逐层离心。用途：分离大小相差悬殊细胞和细胞器。沉降次序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体——内质网与高基体——核蛋白体。可将细胞器初步分离，常需深入经过密度梯离心再行分离纯化。细胞热力学研究方法第4页

差速离心细胞热力学研究方法第5页

LowspeedHighspeedDifferentialcentrifugation细胞热力学研究方法第6页

Velocity(A)andEquilibrium(B)sedimentation细胞热力学研究方法第7页

（二)密度梯度离心用介质在离心管内形成一连续或不连续密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质顶部，经过离心力场作用使细胞和细胞成份分层、分离。类型：速度沉降、等密度沉降。惯用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。分离活细胞介质要求：1)能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；2)PH中