HIV检测简介.ppt

界定HIV感染的实验室诊断； 认识不同的HIV 抗体试验； 了解试验特征：灵敏度、特异度、预测值 、假阳性和假阴性结果； 认识不同的检测策略； 了解和探讨保密、匿名检测和知情同意。 HIV 诊断 HIV 感染主要诊断依据是检测感染者血中抗HIV抗体. 有三种主要的HIV 抗体检测试验： 酶联免疫吸附试验（ELISA）； 免疫印迹试验(WB)； 快速HIV 试验(RT)。 ELISA 酶联免疫吸附试验（ELISA）； 如果待测血浆中出现HIV 抗体，则它会与固定于试验孔内的HIV 抗原以及随血浆加入的同类酶联抗原形成夹心； 试验孔经过彻底洗涤后除去未结合的酶。 ELISA 加入一种显色剂； 结合形式的酶会催化显色反应； 血浆中出现的抗体就会由于颜色变化而被显示出来。 ELISA酶联免疫吸附实验 HIV 抗原包被平板 病人抗体 酶 显色剂 阳性 阴性 ELISA 平板 对照 阳性 阴性 ? 结果 免疫印迹实验（WB） 检测血浆中能与各种病毒蛋白反应的HIV 抗体； 不同的病毒蛋白根据其分子量不同在电泳凝胶上被分成不同的条带； 然后将这些蛋白质转移或点到硝酸纤维膜上，与病人血浆共同培养。 免疫印迹试验（WB） HIV 抗体与特异抗原蛋白反应，并结合到纤维膜目标蛋白所移动到的位置上； 用测色技术检测结合的抗体。 免疫印迹试验（WB） Gp 160 Gp 120 p66 p55 p51 Gp 41 p31 p24 p17 阳性 不确定 阴性 快速诊断试验（RT） 快速试验应用各种技术，包括： 颗粒凝集法； 侧向流动膜法； 流动穿透膜法； 测试条检测法； 多数试验灵敏度和特异度分别达到99%和98%。 快速诊断试验（RT） 优点: 操作快； 不需定量； 不需专门设备和人员培训； 同一天出结果。 为保证试验质量，必须用WHO 推荐的快速HIV 抗体试验。 试验特征 每一个生物学试验都有可能产生假阳性和假阴性结果； 生物学试验的精确度可用三个指标来描述: 灵敏度； 特异度； 预测值。 灵敏度 一个试验检出阳性的能力； 高灵敏度的试验很少产生假阴性结果； 高灵敏度的试验用于绝对避免假阴性结果的情况，如输血服务。 特异度 一个试验检出真阴性的能力； 高特异度的试验很少产生假阳性结果； 高特异度的试验用于绝对避免假阳性结果的情况，如个体的HIV 感染的诊断。 HIV检测结果的含义 阴性结果：未检测到HIV抗体 受试者未感染HIV 或 体内尚未来得及对病毒产生抗体 阳性结果：检测到HIV抗体 不确定：受试者由于急性血清阳转，在血液内有抗体，其与HIV抗体十分近似。 确认试验通常可排除假阳性结果 HLA细胞抗原可能会交叉反应，并导致对患有以下疾病的患者的ELISA试验或快速试验产生假阳性结果： 风湿性关节炎 多发性硬化 狼疮 1类糖尿病 艾迪生病 关节强硬性脊椎柱炎 慢性肝炎 恶性肿瘤 严重肾病 以及有以下经历的人： 过去30天内接受流感疫苗注射 丙种球蛋白注射 最近进行了输血或器官移植 HIV 抗体检测不能用来诊断： HIV 急性（新近）感染 或 新生儿HIV 感染 HIV急性感染 “窗口期”： 从首次急性感染HIV 到病人血液中可检测出HIV 抗体这一时间段； 尽管HIV 抗体检测阴性，但HIV 病毒在机体中快速复制，窗口期病人有高度传染性。 一般持续12周，如用较敏感HIV 抗体试验可能会缩短些（尤其是与p24抗原并用，见下文）。 新生儿HIV 感染的诊断 由于母体抗体可以输送给新生儿，因此抗体检测不能诊断新生儿HIV 感染； 18个月以内均可检测到来自母亲的抗体； 新生儿HIV 感染的早期检测的非抗体试验包括： HIV p24 抗原； 病毒培养； 病毒基因的检测（HIV DNA或 HIV RNA）。 保密和匿名检测 自愿 – 求询者在检测前咨询后，在无强迫的情况下，必须提供作HIV 检测的知情同意； 保密 – 使用三种常用的方法来保证： 有关联的检测； 有关联的匿名检测； 无关联的匿名检测。 HIV抗体筛查检测流程 样 品 初筛检测 筛查试剂 阳性反应 阴性反应 重复检测 原有试剂加另外一种筛查试剂 一阴一阳 均阴性反应 均阳性反应 送确认实验室确认 报告阴性 HIV抗体确认检测流程 阳性反应 免疫印迹法（WB，HIV-1/2混合型） HIV-1阳性反应 不确定反应 应 出现HIV-2指示条带 报告HIV-1阳性 不确定反应 阴性反应 报告阴性 每3个月随访1次，共2次，仍属可疑，则报告阴性；如随访期间HIV抗体出现阳性反应则报告阳性。随访期间可根据需要，检测病毒核酸和或P24抗原，作为辅助诊断。 阴性反应 报告阴性 筛查试验阳性反应样品 报告HIV-2血清学阳性 免疫印迹法（WB，H