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浅谈HPLC法检测咸鸭蛋中非法添加苏丹红染料 杨沫银 内蒙古食品药品检验所（010020） 摘要：目的：完善检测方法，更好的监控非法添加物。方法：采用高效液相色谱法，改变提取溶剂。结果：苏丹红、、、Objective: To perfect the method of measure method, Better monitoring of illegal additives. Method: Adopt HPLC to change the solvent extraction. Results: the calibration curve showed a good linearity with the range of 0μg/ml -2.56μg/ml for sudan , the range of recovery was 66%-80%, the limit of detection was 3.3μg/kg-7.5μg/kg (According to calculation of the total egg). Conclusion: the methed is simple and the result is accurate. 苏丹红属于化工染料，有、、、号四种具有结构对人体的肝肾器官有明显的毒作用经毒理学研究表明，苏丹红具有致突变性和致癌性国禁止于食品中。y=42.78x+0.2488 r=0.9999 苏丹红Ⅱ浓度（μg/ml） 0 0.1671 0.3342 0.6684 1.3368 2.6736 峰面积积分值平均值 0 7.0934 14.10284 29.97735 58.42848 117.8936 回归方程（苏丹红Ⅱ） y=44.132x-0.1852 r=0.9999 苏丹红Ⅲ浓度（μg/ml） 0 0.1599 0.3198 0.6396 1.2792 2.5585 峰面积积分值平均值 0 6.783685 13.03387 27.85217 54.41752 110.2893 回归方程（苏丹红Ⅲ） y=43.122x-0.2311 r=0.9999 苏丹红Ⅳ浓度（μg/ml） 0 0.1609 0.3218 0.6436 1.2872 2.5745 峰面积积分值平均值 0 5.946615 11.76104 24.9113 48.44117 99.15771 回归方程（苏丹红Ⅳ） y=38.504x-0.3077 r=0.9999 4.4 回收率试验 取已知不含添加剂的空白样品2份，分别精密加入苏丹红对照品适量，按拟订的含量测定方法制备供试品溶液，测定每份样品中苏丹红的含量，计算回收率。结果见表3 表3 回收率试验结果 编号 取样量（g） 对照品加入量（μg） 样品含量（μg） 回收率（%） 1 苏丹红Ⅰ 2.311 1.2867 0.9173 71.28 苏丹红Ⅱ 1.3368 0.9890 73.98 苏丹红Ⅲ 1.2792 0.8536 66.72 苏丹红Ⅳ 1.2872 1.0326 80.21 2 苏丹红Ⅰ 2.881 1.2867 0.9982 77.57 苏丹红Ⅱ 1.3368 0.9688 72.47 苏丹红Ⅲ 1.2792 0.8881 69.42 苏丹红Ⅳ 1.2872 1.0057 78.13 4.5方法最低检出限试验 取已知不含添加剂的空白样品，分别精密加入苏丹红对照品适量，按拟订的含量测定方法制备供试品溶液，测定每份样品中苏丹红的含量，计算最低检出限。结果见表4 表4 最低检出限测定结果 苏丹红Ⅰ 苏丹红Ⅱ 苏丹红Ⅲ 苏丹红Ⅳ 按总蛋重计算（μg/Kg） 3.3 7.1 7.1 7.5 按蛋黄重计算（μg/Kg） 9.4 20.4 20.4 21.5 5.实验结果 在选定的条件下，苏丹红（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）与样品中其他组分色谱峰可基线分离，分离度均大于1.5，且苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ色谱峰之间基线分离，分离度均大于1.5；按苏丹红（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）峰计算，理论板数（N）均在10000以上。对照品、供试品、加样回收试验、最低检出限试验的HPLC图谱见图1～4。 6.讨论 6.1 层析用氧化铝活化程度的考察 不同厂家和不同批号氧化铝的活度有差异，须根据具体购置的氧化铝产品略作调整，活度的调整采用标准溶液过柱，将1μg/ml的苏丹红的混合标准溶液1ml加到柱中，用5%丙酮正己烷溶液60ml完全洗脱，4种苏丹红在层析柱上的流出顺序为苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ、苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅲ，可根据每种苏丹红的回收率作出判断。苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ的回收率较低表明氧化铝活性偏低，苏丹红Ⅲ的回收率偏低时