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- 2017-09-29 发布于广西
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实验设计专题研究系列之(二十六) 有关基因工程的探究 实验专项 1.探究目的基因插入质粒上的位置情况:若运载体上含抗青霉素基因a和抗四环素基因b,当目的基因插入a片段中,则该基因不表达,在青霉素培养基上不存活,在四环素培养基上存活;若插入b基因片段,则结果相反。 2.探究质粒上抗性基因的情况 (1)方法:将重组后的质粒导入受体细胞,分别放在含青霉素、四环素的培养基上培养,观察成活情况。 (2)现象结论:①都成活——两种标记基因都有;②只有一个培养基上成活——只有其中一种,抗青霉素基因或抗四环素基因;③都不成活——两种抗性基因都不存在。 【典例示范】 (2010·浙江五校联考)大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和Xgal时,Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β半乳糖苷酶,培养基中的Xgal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题: (1)作为受体,大肠杆菌应_________________________________, 以方
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