586-玻璃器皿清洗 与试剂配制.pptVIP

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玻璃器皿清洗 与试剂配制 一、玻璃器皿清洗 (一)目的及意义 新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质和灰尘,而使用过的玻璃仪器其内壁上往往粘附许多污染物(包括有机物及金属离子等)。而实验中所使用的玻璃仪器清洁与否,直接影响实验结果,往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差,甚至会出现相反的实验结果。因此,实验用器皿洗涤清洁工作是十分重要的基本操作,是做好实验的前提及实验成败的关键之一。 (二)玻璃器皿清洗程序 1、先在肥皂水(或去垢剂)中浸泡后用毛刷仔细洗刷,再用自来水冲洗干净。 2、置于重铬酸钾-浓硫酸洗液中浸泡,浸泡时间视实验对玻璃仪器要求的清洁程度而定。 3、从洗液中取出后反复用自来水冲洗干净。 4、再用蒸馏水清洗2-3次,作细胞培养用的玻璃仪器还要用双蒸水清洗2-3次。 5、用烘箱烘干或自然晾干备用。 二、试剂配制 (一)目的及意义 化学试剂的配制是科学实验的基本操作,实验结果的好坏,往往与化学试剂的配制有关,而不同的化学试剂又有不同的配制方法和程序,因此,试剂配制方法和程序,是实验成败的重要因素。 各种化学试剂一般都需要在实验前配制好待用,不能在实验过程中现配,所以化学试剂的配制 也是实验前的一项准备工作。 (二)化学试剂配制的注意事项 1、称量准确 2、蒸馏水配制(特殊要求除外) 3、药品规格应与试剂要求的质量一致 4、用量不宜过多 5、容器要清洁干净 6、试剂瓶应贴标签(名称、浓度、时间) 7、试剂用后要塞好瓶塞放回原处 (三)固定液的配制 1、中性甲醛的固定液配制 磷酸二氢钠4g ,磷酸氢二钠13g ,溶于880ml蒸馏水中,加 40%甲醛120ml。 2、Zenker固定液 重铬酸钾5g ,升汞(氯化汞)7.5g,溶于 200ml蒸馏水中,加 冰乙酸7.5ml(用时加) 3、ADF固定液 无水乙醇80ml 蒸馏水16ml 浓硝酸4ml 先将无水乙醇装入玻璃瓶中,然后依次加入蒸馏水和浓硝酸 4、2%硝酸银水溶液 硝酸银4g , 溶于196ml蒸馏水中 5、高尔基体固定液 硝酸钴(或氯化镉)2g,溶于 100ml蒸馏水中 ,加 40%甲醛60ml。 6、硝酸银还原液 对苯二酚4 g,无水硫酸钠0.30g,溶于200ml 蒸馏水 中,加40%甲醛20ml 7、Regaud固定液 重铬酸钾12g,溶于388ml蒸馏水中,加40%甲醛100ml (四)染色剂的配制 1、Wright染液 Wright粉剂1g 甲醇500ml 将粉剂置于研钵内,充分研磨,越细越好,然后将甲醇逐步加入研钵内,边加边研直至粉剂全部溶解,置于棕色玻璃瓶中避光保存,一周后方可使用。 2、Harris苏木精 Ⅰ液:苏木精2 g 无水乙醇20ml Ⅱ液:硫酸铝钾(铵)40 g 蒸馏水400ml 先将Ⅰ液中的苏木精充分溶解,再将Ⅱ液煮沸熔化,去火,速加Ⅰ液,再煮沸,去火,速加1 g 氯化汞再煮沸,迅速冷却后加16ml冰乙酸,过滤备用。 3、1%伊红染液 取伊红5g溶于50ml蒸馏水中,加冰乙酸5ml混匀,加蒸馏水5ml混匀,再加加冰乙酸5ml混匀,产生红色沉淀后再加蒸馏水50ml混匀后过滤,将沉淀物连同滤纸一起放在60。C恒温箱中烤干,待干燥后溶入500ml 95%乙醇中。即1%伊红染液。 4、0.5%盐酸酒精(分色剂) 300ml 70%乙醇中加入1.5ml浓盐酸,即0.5%盐酸酒精。 5、饱和碳酸锂水溶液(返蓝剂) 300ml蒸馏水中逐步加入碳酸锂并不停搅拌,直至出现沉淀物为止。 6、 5%铁明矾水溶液 铁明矾10g,溶于190ml蒸馏水中 7、3%重铬酸钾水溶液 重铬酸钾12g,溶于388ml蒸馏水中 (五)常用试剂的配制 1、脱水剂:50%、70%、80%、90%、95%的乙醇各500ml。以上浓度用95%的医用酒精配制,100%酒精用瓶装无水乙醇。 2、透明剂:二甲苯 3、生理盐水:NaCl 9克,溶入1升蒸馏水中 4、磷酸缓冲液:配制PH7的磷酸缓冲液2000ml(见后面方法与附表) (二)重铬酸钾-浓硫酸洗液的配制 重铬酸钾-浓硫酸洗液是玻璃器皿的最常用的

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