《人体显微形态学》实验人类外周血淋巴细胞培养.pptVIP

* 实验三 人类外周血淋巴细胞培养 目的要求 1、熟悉淋巴细胞培养原理 2、掌握人类外周血淋巴细胞培养技术 实验内容 人类外周血淋巴细胞培养 实验原理 健康成年人体内淋巴细胞约有500×109个，其中 约2%在外周血中循环。在通常情况下，它们处 于G0或G1期。植物血球凝集素（PHA）可以刺激 淋巴细胞进行有丝分裂。在相当于人体内环境（温 度、营养条件、生长因子等）中， G0或G1期淋巴细 胞转化为淋巴母细胞，重新进入增殖周期，进行有丝 分裂。当体外培养至约72小时，大多数细胞处于第3 增殖周期内，此时用有丝分裂阻断剂处理，可使细胞 停止在有丝分裂中期。 培养基制备 1640培养液：1640粉剂+碳酸氢钠适量+小牛血清10%+PHA+肝素适量，pH值为7.2。 199培养液：199粉剂+碳酸氢钠适量+小牛血清5%+PHA+肝素适量，pH值为7.4。 实验步骤 1、学习实验原理 2、各项准备工作 3、下周实验课前约72小时 （上一周六上午）在实验室抽取外周血 培养。 注意事项 1、实验原理要理解 2、部分准备工作班长作：培养液解冻、酒精灯、 消毒棉签、空针、压脉带、小烧杯。 3、下周实验课前约72小时 （上一周六上午）在实验室抽取外周血培养。 * * * 实验田