氨基酸的分离鉴定——纸层析法.pptVIP

氨基酸的分离鉴定——纸层析法 一、实验目的 掌握氨基酸纸层析的方法和原理，学会分析待 测样品的氨基酸成分。 二、实验原理 纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，吸附一层水作为固定相，有机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。 溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示： Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。 三、实验器材 （1）大烧杯 （2）毛细管 （3）喷雾器 （4）培养皿 （5）层析滤纸 （6）直尺、铅笔：自备。 （7）鼓风干燥箱 （8）订书机 （9）塑料薄膜 （10）小烧杯 四、实验试剂 （1）扩展剂：将4体积正丁醇和1体积冰醋酸放入分液漏斗中，与5体积水混合，充分振荡，静置后分层，弃去下层水层。 （2）氨基酸溶液：0.5%的已知氨基酸溶液5种（赖氨酸、脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸及其它们的混合液（各组分浓度均为0.5%）。 （3）显色剂：0.1%水合茚三酮正丁醇溶液。 实验试剂 五、实验操作 检查培养皿是否干燥、洁净；若否，将其洗净并置于干燥箱内120℃烘干。 （1）平衡：剪一大块塑料