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肠道病原菌的分离与鉴定三 肠道病原菌的分离鉴定（3） 细菌的药敏实验结果观察 厌氧菌培养法及厌氧菌生长状态 小白鼠感染肺炎球菌实验结果观察 细菌致病性试验 双糖铁培养基的制备 成分：脲 胨、乳 糖、蛋白胨、葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、硫代硫酸钠、琼脂、蒸馏水、酚红水溶液 制法：加热溶解校正pH为7.2，然后加入0.4％酚红水溶液，分装试管，高压灭菌，使成为底层较深的斜面。 用途：初步鉴别肠道致病菌用，可以观察葡萄糖、乳糖的发酵，并可观察有无H2S产生及细菌有无动力。 原理 该培养基中只加少量的葡萄糖与较多量的乳糖。细菌分解糖类产酸可使培养基局部指示剂改变颜色。当分解葡萄糖的细菌在斜面上生长时，产生的酸少，又在有O2的情况下氧化，生成CO2和H2O，失去改变局部酸碱度的作用，所以培养基斜面部分不变色。但当细菌分解乳糖时产生酸量较多，故培养基斜面部分可变色。细菌在高层中生长时，因处于无O2状态，产生的酸不分解，故使高层部分培养基指示剂变色。硫酸亚铁可与产生的H2S作用，生成FeS使培养基变黑。硫代硫酸钠是一种还原剂，防止培养基中氧化物与H2S作用而影响FeS的生成。 生化反应结果观察 血清学鉴定 主要沙门氏菌抗原结构表 厌氧培养法 材料：厌氧罐、厌氧气袋、钢丝绒、厌氧手套箱、干燥皿、焦性没食子酸等。 方法：厌氧菌的培养方法种类较多，总体上可以分为三大类：物理法、化学法和生物耗氧法。