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肠道杆菌的分离鉴定（三） 1、观察双糖含铁培养基、靛基质试验结果 2、血清学鉴定：玻片法 3、尿素酶试验 4、肥达氏反应试验 材料： 指示剂： 柯氏(kovac)试剂(靛基质试剂） 实验材料 (1)待检菌的培养物。 (2)沙门氏菌属A—E群多价O血清。 (3)志贺氏菌属多价血清。 (4)玻片、接种环、酒精灯、火柴、记号笔等。 实验方法 取可疑病原菌菌落的一部分与沙门氏菌属A-E群多价 O血清和志贺氏菌属多价血清分别进行玻片凝集反应, 观察是否凝集。 具体方法如下: (1)取清洁玻片一张，用蜡笔划为三格，并注明号码。按无菌操作方法用接种环于第一格内加沙门氏菌属A-E群多价O血清l～2滴，第二格内加志贺氏菌属多价血清1-2滴，第三格内加盐水1—2滴。 (2)无菌操作下用接种环分别取少许可疑病原菌菌落与血清或盐水混合成均匀乳状(注意：取菌量不宜过多，使悬液呈轻度乳浊即可)。 (3)轻轻摇动玻片，经1-2min后观察结果。如待检菌与沙门氏菌属A-E群多价O血清发生凝集，则该菌为沙门氏菌属；如待检菌与志贺氏菌属多价血清发生凝集，则该菌为志贺氏菌属。 方法： 将可疑细菌接种于尿素培养基中，37℃培 养18～24h。 肥达氏反应 原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起 副伤寒的副伤寒沙门菌H抗原与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效