第十章原核生物基因表达的调控.ppt

生物的遗传信息是以基因的形式储藏在细胞内的DNA(或RNA)分子中的。随着个体的发育，DNA有序地将遗传信息，通过转录和翻译的过程转变成蛋白质，执行各种生理生化功能，完成生命的全过程。从DNA到蛋白质的过程，叫做基因表达(gene expression)，对这个过程的调节就称为基因表达调控(gene regulation或gene control)。 基因调控是现阶段分子生物学研究的中心课题。要了解生物生长发育的规律、形态结构特征和生物学功能，就必须弄清楚基因表达调控的时间和空间概念。 基因表达调控在两个水平上体现 (1)转录水平上的调控(transcriptional regulation); (2)转录后水平上的调控(post-transcriptional regulation)，包括①mRNA加工成熟水平上的调控(differential processing of RNA transcript);②翻译水平上的调控(differential translation of mRNA)。 无论原核还是真核生物，其基因调控主要发生在转录水平上，包括在转录的起始阶段和终止阶段。 对于原核生物，以营养状况(nutritional status)和环境因素(environmental factor)为主要的基因表达影响因素。在真核生物尤其是高等真核生物中，激素水平(hormone level)和发育阶段(developmental stage)是基因表达调控的最主要手段，而营养和环境因素的影响力大为下降。 在转录水平上对基因表达调控取决于DNA的结构、RNA聚合酶的功能、蛋白因子及其他小分子配基的相互作用。 ?F 对?E的活性控制 在前孢子中由早期基因产生?G, ?G使RNA聚合酶在前孢子中转录晚期孢子形成基因。 另一个早期孢子形成基因产物负责和母细胞中的成分联系，?F激活SpoⅡR，SpoⅡR由前孢子分泌，然后它激活膜结合蛋白SpoⅡGA。 活化的SpoⅡGA在母细胞中剪切失活的前体物Pro- ?E使其成为活化因子?E。 诱导物的加入和去除对lac mRNA及LacZ合成的影响 诱导物和阻遏蛋白结合的模型 gal 操纵子的结构 (1) 有Gal P1启动 K,T,E 转录 无 Glc 无Gal P1不启动 无Gal OE 与O I 结合形成环，仅转 有 录20bp 有Gal P2启动 S2 转录galE，组成型 (2) CAP-cAMP对P1 正调节，对P2 抑制 (3) 阻遏物对P1，P2 都是负调控， CAP-cAMP 含量少时P2 可转录 (机制不清) (4)P1与RNA Pol亲和力 P2与RNA Pol亲和力，所以在没有Glc而有Gal存在时，P1转录，而P2不转录。 为什么gal 操纵子需要两个转录起始位点？ 半乳糖不仅可以作为唯一碳源供细胞生长，而且与之相关的物质--尿苷二磷酸半乳糖（UDPgal）是大肠杆菌细胞壁合成的前体。在没有外源半乳糖的情况下，UDP-gal是通过半乳糖差向异构酶的作用由UDP-葡萄糖合成的，该酶是galE基因的产物。 生长过程中的所有时间里细胞必须能够合成差向异构酶。假如只有S1一个启动子，那么由于这个启动子的活性依赖于cAMP-CAP，当培养基中有葡萄糖存在时就不能合成异构酶。 假如唯一的启动子是S2，那么，即使在葡萄糖存在的情况下，半乳糖也将使操纵子处于充分诱导状态，这无疑是一种浪费。无论从必要性或经济性考虑，都需要一个不依赖于cAMP-CAP的启动子（S2）对高水平合成进行调节。 3. 调控 蛋白质的正常合成及饥饿时的严紧反应 ppGpp对rnn转录的抑制： ppGpp能抑制rRNA操纵子的启动子的转录起始，从而抑制rRNA和tRNA的合成 三、严紧反应 把培养基中营养缺乏，蛋白质合成停止后，RNA合成也趋于停止的现象称为严紧控制（rel+）；反之则称为松散控制（rel-）。研究发现，在氨基酸缺乏时，rel+ 菌株能合成鸟苷四磷酸（ppGpp）和五磷酸（pppGpp），而rel- 菌则不能。 ppGpp和pppGpp在薄层层析图谱上的迁移率与常见的核苷酸不同，形成的斑点称为魔斑。 严紧因子RelA催化pppGpp的形成：