分光光度法测定青果多酚的含量.docVIP

分光光度法测定青果多酚的含量 摘要：以没食子酸为标准品，使用酚试剂，采用分光光度法对青果（ｆｒｕｃｔｕｓ ｃａｎａｒｉｉ）多酚的含量进行检测。结果表明，酚试剂用量为１．５ ｍｌ，与６ ｍｌ质量分数１０％的ｎａ２ｃｏ３溶液混合，３０ ℃反应６０ ｍｉｎ，于７６５ ｎｍ处测定吸光度，没食子酸浓度在０．５～２．５ ｍｇ／ｌ范围内与吸光度有良好的线性关系，回归方程为y＝０．１２１ ２x＋０．００４ 0。该方法能较准确地定量分析青果多酚含量，具有简便、快速、稳定，重现性好的优点。 关键词：分光光度法；酚试剂；青果（ｆｒｕｃｔｕｓ ｃａｎａｒｉｉ）；多酚 ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ pｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｆｒｏｍ ｆｒｕｃｔｕｓ ｃａｎａｒｉｉ ｂｙ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ｘｉａｎｇ ｌｉａ，ｚｈｏｕ ｔｉｅ－ｊｕｎｂ，ｗａｎｇ ｇｕａｎｇ－ｘｉａ （ａ． ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｂｉｏｌｏｇｙ；ｂ． ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｌｕｚｈｏｕ ｍｅｄｉｃａｌ ｃｏｌｌｅｇｅ， ｌｕｚｈｏｕ ６４６０００，ｓｉｃｈｕａｎ，ｃｈｉｎａ） ａｂｓｔｒａｃｔ： ｔｈｅ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ in ｆｒｕｃｔｕｓ cａｎａｒｉｉ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ｗｉｔｈ ｆｏｌｉｎ－ｃｉｏｃａｌｔｅｕ ｒｅａｇｅｎｔ ａｎｄ gａｌｌｉｃ ａｃｉｄ as standard． ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ that ｔｈｅ ｂｅｓｔ detection ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｔｈａｔ mixing １．５ ｍｌ ｆｏｌｉｎ－ｃｉｏｃａｌｔｅｕ ｒｅａｇｅｎｔ ｗｉｔｈ ６ ｍｌ １０％ ｎａ２ｃｏ３（ｍ／ｖ）， ａｎｄ ｔｈｅｎ reacting ｆｏｒ ６０ ｍｉｎ ａｔ ３０ ℃ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｔ ７６５ ｎｍ． ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｗａｓ ０．５～２．５ ｍｇ／ｌ in which ｔｈｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ y＝０．１２１ ２x＋０．００４ 0． ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｓｉｍｐｌｅ， ｆａｓｔ， ｓｔａｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ in ｆｒｕｃｔｕｓ cａｎａｒｉｉ． ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ； ｆｏｌｉｎ－ｃｉｏｃａｌｔｅｕ ｒｅａｇｅｎｔ； ｆｒｕｃｔｕｓ cａｎａｒｉｉ； ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ 青果（ｆｒｕｃｔｕｓ ｃａｎａｒｉｉ）别名橄榄，为橄榄科植物橄榄的果实，青果具有抗菌［１］、抗病毒［２］、抗肿瘤和抗氧化作用［３－５］，有较高的药用价值。青果化学成分包括挥发性成分、三萜类化合物、香豆精、多酚、蛋白质和氨基酸、脂肪和脂肪酸、矿物质、微量元素等多种成分。其中，多酚为青果中的重要化合物，是其主要功效成分。泸州合江是四川省青果生产基地，具有丰富的种质资源，开发青果的药用价值对继承和发展我国传统医学以及带动和促进当地青果的产业化发展具有重要意义。本研究应用福林－酚比色法对青果多酚进行定量分析，为进一步筛选青果品种，综合开发其药用价值提供参考。 １ 材料与方法 １．１ 材料与仪器 材料：青果（购自泸州宝光医药有限公司，选择优质果实洗净，风干，粉碎）。 分析纯试剂：乙醇、碳酸钠、没食子酸标准品（批号ｍｕｓｔ纯度≥９８％，中国食品药品检定所）；化学纯试剂：酚试剂。 仪器：ｊｙ９６－ⅱ超声粉碎仪（宁波新芝生物科技股份有限公司）；ａｌ１０４／００电子天平（梅特勒－托利多仪器有限公司）；ｓｐ－７５２型紫外－可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；ｄｋ－９８－１恒温水浴锅（天津泰斯特仪器有限公司）。 １．2 方法 准确称取１０ ｍｇ没食子酸标准品，定容于１０ ｍｌ容量瓶中，配制成１ ｍｇ／ｍｌ标准液，取１ ｍｌ标准液定容至１００ ｍｌ，得１０ μｇ／ｍｌ工作液。准确称取青果果实粉２．０ ｇ，溶于４０ ｍｌ的４０％乙醇（体积分数）中，超声４５ ｍｉｎ后，取提取液抽滤，即为样品液，采用分光光度法对青果多酚的含量进行检测［６－８］。 ２ 结果与分析 ２．１ 测定波长的选择 分别取没食子酸标准溶液和青果样品液在４００～９００ ｎｍ范围内扫描，两者在７６５ ｎｍ处均有最大吸收峰，故选择７６５ ｎｍ为测定波长。 ２．２ 试剂用量的确定［９］ 酚试剂与１０％的ｎａ２ｃｏ３（质量分数，下同）溶液比例的确定：取１．５ ｍｌ没食子酸标准溶液，加入１．５ ｍｌ酚试剂，混匀后分别加入０．７５、１．５、３．０、４．５、６．０和７．５ ｍｌ 10