不同浓度CPPU对欧亚旋覆花愈伤组织诱导的影响.docVIP

不同浓度CPPU对欧亚旋覆花愈伤组织诱导的影响 摘要：以欧亚旋覆花（inula britannica l.）无菌苗为材料，研究了不同浓度调吡脲（ｃｐｐｕ）对其叶片、根愈伤组织诱导的影响。结果显示，ｃｐｐｕ的浓度为０．１０ ｍｇ／ｌ时，叶片的愈伤组织诱导率为８２．９％，且诱导出的愈伤组织生长好。ｃｐｐｕ的浓度为０．５０ ｍｇ／ｌ时，根的愈伤组织诱导率最高，达１００．０％，愈伤组织生长最好，呈浅黄绿色，部分带有红色斑点，质地疏松，具光泽。 关键词：调吡脲（cppu）；欧亚旋覆花（inula britannica l.）；愈伤组织诱导 influence of cppu concentration on callus induction of inula britannica ｚｈｏｕ ｈｏｎｇ－ｊü （ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅ， ｈｅｎｇｓｈｕｉ ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， ｈｅｎｇｓｈｕｉ ０５３０００，hebei，ｃｈｉｎａ） ａｂｓｔｒａｃｔ： ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｌｅａｖｅｓ ａｎｄ ｒｏｏｔ ｏｆ ｉｎｕｌａ ｂｒｉｔａｎｎｉｃａ ｌ． ａｓｅｐｔｉｃ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ， ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｐｐｕ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｌｌｕｓ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ． ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｅａｆ ｗａｓ ａｓ ｈｉｇｈ ａｓ ８２．９％ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｐｐｕ ｉｎ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ０．１０ ｍｇ／ｌ； ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｃａｌｌｕｓ ｗａｓ ｗｅｌｌ． ｔｈｅ ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｒａｔｅ ｏｆ ｒｏｏｔ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｐ ｔｏ １００％ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ０．５０ ｍｇ／ｌ ｃｐｐｕ； ｔｈｅ ｃａｌｌｕｓ ｗａｓ ｌｉｇｈｔ ｋｅｌｌｙ， ｌｏｏｓｅ ａｎｄ ｇｌｏｓｓｙ． ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｐｐｕ； ｉｎｕｌａ ｂｒｉｔａｎｎｉｃａ ｌ．； ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ 欧亚旋覆花（inula britannica l.）是菊科多年生草本植物，是一种中草药，含多种生物活性成分。其含有的乙酰大花旋覆花内酯具有和紫杉醇相似或更强的抗癌活性，可作为一种有效的天然化学防癌剂和治疗药物［１］，但其活性成分在原植物中的含量极低且不稳定，产自山西的欧亚旋覆花中乙酰大花旋覆花内酯的含量为０．５８％，而产于河北的则为０．３４％［２］。持续地从野生欧亚旋覆花中提取有效活性成分势必会破坏生物多样性和生态系统的平衡。采用植物组织培养的方法使得该类活性成分的获取在人为可控及可持续生产的条件下进行，具有广阔的应用前景。 调吡脲（ｃｐｐｕ）是一种人工合成的吡啶取代脲类的细胞分裂素，具有诱导愈伤组织生长，促进芽的发育、种子的萌发，保绿和延缓衰老等显著的生理活性［３］。ｃｐｐｕ诱导细胞分裂和促进器官发生的活性远远高于一般嘌呤类细胞分裂素的活性［４］。低浓度的ｃｐｐｕ能促进草莓愈伤组织分化［５］、香蕉不定芽增殖［６］等。 以欧亚旋覆花无菌苗为材料，研究不同浓度cppu对其叶片、根愈伤组织诱导的影响，为其愈伤组织的培养提供理论依据。 １ 材料与方法 １．１ 材料 欧亚旋覆花无菌苗由河北医科大学组织培养室培养所得。 １．２ 方法 切取欧亚旋覆花无菌苗的根和叶片作为外植体，接种到附加不同浓度ｃｐｐｕ（０、０．０５、 ０．１０、０．５０、１．００ ｍｇ／ｌ）、６－ｂａ ０．５ ｍｇ／ｌ、ｎａａ １．０ ｍｇ／ｌ的ｍｓ培养基上，黑暗培养，诱导温度为（２３±１）℃，４０ ｄ后统计愈伤组织诱导率和观察愈伤组织生长状况，每个处理接种３５个外植体， ３次重复。研究不同浓度ｃｐｐｕ对欧亚旋覆花愈伤组织的诱导情况。 ２ 结果与分析 ２．１ 不同浓度ｃｐｐｕ对叶片愈伤组织诱导的影响 表１表明，ｃｐｐｕ对欧亚旋覆花叶片愈伤组织诱导率及愈伤组织诱导出后生长有一定的作用，从愈伤组织诱导率来看，在不同浓度的ｃｐｐｕ中，以０．１０ ｍｇ／ｌ的愈伤组织诱导率最高，为８２．９％，低浓度和高浓度的ｃｐｐｕ均导致愈伤组织诱导率降低， ｃｐｐｕ浓度为１．００ ｍｇ／ｌ时已完全抑制外植体产生愈伤组织。从愈伤组织生长情况来看，ｃｐｐｕ浓度为０．１０ ｍｇ／ｌ时，愈伤组织生长较好，其他浓度下，愈伤组织生长一般。从出芽状况上看，不添加ｃｐｐｕ时，叶脉处有腋芽生成，且生长健壮，ｃｐｐｕ浓度为０．０５ ｍｇ／ｌ时叶脉处有叶芽生成，但生长较弱，ｃｐｐｕ的浓度大于０．１０ ｍｇ／ｌ时，叶脉处无