人教版选修三专题1.2、3知识点.docVIP

1.1 DNA重组技术的操作工具 一、操作工具 （一）限制酶 来源：原核生物 特点：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 结果：产生粘性末端和平末端 （二）DNA连接酶 分类：大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶 作用于磷酸二酯键 （三）运载体 种类：质粒、动植物病毒、噬菌体衍生物 运载体要具备的条件：① 一个或多个限制酶切割位点② 自我复制能力③ 有标记基因 1.2 基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取： 1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 结构基因___。 2．获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因 基因组文库 ②基因文库 cDNA文库 （2）利用PCR技术扩增目的基因。 ①PCR：是一项在生物体外 复制 特定DNA片段的核酸合成技术。 ②前提条件：已知目的基因的 核苷酸 序列。 ③原理：__DNA复制__ （3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。 二、基因表达载体的构建 （1）表达载体的组成：目的基因+ 启动子 + 终止子 +标记基因等。 （2）启动子：位于基因的 首端 ，它是 RNA聚合酶的 结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。 （3）终止子：位于基因的 尾端 ，终止 转录