6第十一章 微生物的遗传和变异.pptVIP

Griffith的转化实验 最早进行转化实验的是英国的F. Griffith，他以肺炎链球菌作为研究对象。肺炎链球菌可使人患肺炎，也可使小鼠患败血症而死亡。 肺炎链球菌有许多不同的菌株，有荚膜者是致病性的，它的菌落表面光滑，故称S型；有的不形成荚膜，无致病性，菌落外观粗糙，故称R型。 Griffith转化试验示意 混合培养 R型活菌 S型活菌 S型热死菌 R型活菌 S型活菌 健康 健康 健康 健康 健康 健康 健康 病死 病死 病死 二. 接合(conjugation) F因子存在方式及相互关系 F++F- 性菌毛收缩搭桥 从otiT开始滚环复制 接合对分离 Hfr+F- F质粒结构简图 Hfr接合中断试验 （二）转导（transduction） 通过完全或部分缺陷噬菌体为媒介，将供体菌的 DNA片段携带到受体细胞，通过交换与整合，从而使 受体菌获得供体菌的部分遗传性状。 细菌转导的类型 普遍转导 局限转导 完全转导 流产转导 高频转导 低频转导 普遍性转导( generali-zed transduc-tion) 装配，误包 侵染 复制 裂解释放 侵染新宿主菌 形成转导子 准备过程 真正转导 完全转导 流产转导 局限转导 通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌并表达的转导现象。 供体菌基因 →（部分缺陷噬菌体）→ 受体菌 举例： E.coli 的λ噬菌体，在其插入位点两侧为gal和bio基因，不正常切割时可包装入噬菌体外壳，形成缺陷噬菌体，再感染时形成局限性转导。 局限性转导( restricted transduction) 1、低频转导（low frequency transduction，LFT） 温和噬菌体λ裂解时的不正常切割：包含gal或bio基因（几率一般仅有10-6） 缺陷噬菌体在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装，提供所需要的裂解功能，形成转导颗粒。但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力，感染受体细胞后，通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的转导子。 2、高频转导（high frequency transduction，HFT） gal 10－6 gal λ噬菌体感染E.coli λ噬菌体误切割 LTF裂解物＋噬菌体感染E.coli 双重溶源菌 LTF裂解物 50% 50% 2、高频转导（high frequency transduction，HFT） 形成阳性转导子 形成噬菌斑 gal－ gal gal－ LTF裂解物感染E.coli（gal-） 双重溶源菌 HTF裂解物 四. 原生质体融合(protoplast fusion) 优点：扩大了基因重组的范围，如光合细菌与酵母菌的融合 方法：加入融合诱导剂（如聚乙二醇 PEG）或施加特殊的物理刺激(如高压直流电脉冲) 概念 五 重组 概念 两个或两个以上核酸分子的重排 主要类型 同源重组 位点专一性重组 转座重组 同源重组 common in DNA viruses 菌种的保藏 低温保藏方法（3-6月） 石蜡油低温保藏（1-2年） 沙土管保藏法（1-10年） 液氮保藏方法（20年以上） 真空冷冻干燥法（5-15年以上） 控制传代的次数 创造良好的培养条件 利用不同类型的细胞进行接种传代 对菌种采用有效的保藏方法 菌种衰退的防止 菌种的复壮 纯种的分离 通过寄主体进行复壮 淘汰已衰退的个体 重点 微生物的遗传物质 质粒和转座子 基因突变的类型、分子机制及特点 基因的转移和重组（转化、接合、转导） * 第十一章 微生物的遗传和变异 周伟东 §1 遗传的物质基础一 微生物的遗传物质——核酸 原核细胞型微生物——DNA CCC(covalently colsed circular) dsDNA “θ”复制 真核细胞型微生物——DNA 核小体、染色体/质、转座因子 外显子、内含子、断裂基因 多个复制起点 病毒——DNA/RNA 多种形式 基因组 θ复制，σ复制 二 质粒和转座子 (一)染色体外的遗传物质—质粒 A 共价，闭合，环状，双链DNA（cccDNA）； B 自我复制； C 携带基因非细胞生长所必需； D 具不相容性（干扰近缘质粒）； E 质粒可自行消失或人工驱除； F 质粒可从一个细菌转移到另一个细菌。 （二）常见的细菌质粒 （1）F因子（F质粒）—致育因子/性因子，E.coli中决定性别的质粒。 （2）R因子（R质粒/抗性因子/耐药质粒）—由两个相连的DNA片段组成：抗药决定因子(决定耐药性)和抗药转移因子(耐药性是否转移)。 （3）col因子(colicinogenic factor) —大肠杆菌素因子（colici