奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆_序列分析和结构预测.pdfVIP

第 17卷第 4 期 上 海 水 产 大 学 学 报 Vol. 17 , No. 4 2008年 7 月 JOURNAL OF SHAN GHA I F ISH ER IES UN IV ER SITY Ju ly, 2008 文章编号 : 1004 - 727 1 (2008) 04 - 04 11 - 07 奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆、 序列分析和结构预测 1 1 2 1 唐永凯 , 李建林 , 陈文华 , 俞菊华 ( 1. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和 养殖生物学重点开放实验室 ,江苏 无锡 　2 14081; 2. 上海海洋大学水产与生命学院 ,上海 　200090) ( ) 摘 　要 :采用 R TPCR 和 RACE R ap id Amp lification of cDNA End s 法分离出奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶 ( ) ( ) P450aromA 的全序列 ,得到 1784 bp 的全长 cDNA ,包括 38 bp 5 ’非翻译区 , 1566 bp 阅读框以及含 Poly A 信 ( ) ( ) 号 AA TAAA 的 167 bp 3 ’非翻译区 [不包括 Poly A ] 。阅读框共编码 52 1个氨基酸 ,计算的蛋白质分子量 为 59 ku。同源性分析显示 ,奥利亚罗非鱼 P450aromA 的氨基酸序列与其它鱼性腺 P450arom 具有 70%以上的 同源性 ,与其它鱼脑 P450arom 为 60%左右同源 ,但芳香化酶高保守区包括 I螺旋区 ,芳香化酶特异保守区 II 和血红素结合区 III和其它鱼芳香化酶的同源性分别高达 83% ～96% , 78% ～86% 和 85～100% 。系统发育 分析表明奥利亚罗非鱼 P450aromA 与鱼类性腺 P450arom 属于同一分支的。生物信息学分析显示 :奥利亚罗 非鱼 P450A 基因编码的蛋白无信号肽 ,无跨膜区域 ,为非分泌蛋白, 同时含有多个酪蛋白激酶 II磷酸化位点 , N 糖激化位点 ,N 肉豆蔻酰化位点 ,蛋白激酶 C磷酸化位点 。 关键词 :奥利亚罗非鱼 ;快速扩增 cDNA 末端 ; P450 芳香化酶 中图分类号 : S 917　　　文献标识码 : A Clon ing, sequence and function ana lysis of P450arom from O reoch rom is au rea ovary 1