卫生微生物实验室能力验证结果分析.pdfVIP

· 9O · 浙江预防医学 2012年第 24卷第 3期 Zh~iangPreventiveMedicine，Mar．2012，Vd24，No．3 · 实验技术与检验 · 卫生微生物实验室能力验证结果分析 胡薇薇 赵雪琴 倪敏 商晓春 张睿 中图分类号：R372 文献标识码 ：B 文章编号：1007—0931 (2012)03-0090—03 杭州市下城区疾病预防控制中心 (疾控中心) 氏菌检验》 (GB／T4789．5．-2003)、 《食品安全国 每年都参加国家实验室认可委、浙江省质量技术监 家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检 督局和省、市疾控中心组织的能力验证及实验室室 验》 (GB4789．10_2010)分别对 A、B、c样品 问比对活动，现将 2010年9月微生物实验室能力 进行前增菌、增菌、细菌分离、生化试验和血清学 验证结果报告如下。 试验。 2．2 ATB自动细菌鉴定仪法 对分离的可疑沙门 材料与方法 菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌分别用 ID32E肠杆 1 材料 菌科鉴定条、ID32STAPH葡萄球菌属鉴定条进行 1．1 质控样 品 浙江省质量技术监督局下发的3 鉴定。 份奶粉样品，编号为A、B、C，分别用于沙门菌、 2．3 双色实时荧光PCR法”．2] 取A样、B样增 志贺菌、金黄色葡萄球菌检测能力验证。 菌液分别对沙门菌、志贺菌进行核酸检测：取上清 1．2 培养基及试剂 培养基、细菌生化微量鉴定 液 I一1．5ml无菌离心管中，12000rpm离心5min 管由杭州微生物试剂有限公司、杭州天和微生物试 后弃去上清液，保 留沉淀，加人5O lDNA提取 剂有限公司和青岛海博生物技术有限公司提供；沙 液，将沉淀悬浮后 100oC沸水浴处理5min，再经 门菌诊断血清、志贺菌诊断血清由兰州生物制品研 12000rpm离心5min后，取上清液加人已配制好 究所和 日本生研株式会所生产；沙门菌显色培养基 的反应体系中，于 ABI公司的7500PCR仪进行 由青岛海博生物技术有限公司提供，志贺菌显色培 PCR扩增 。 养基、哥伦 比亚琼脂和 ATB系统鉴定条 由生物梅 结 果 里埃有限公司提供；沙门菌和志贺菌双色实时荧光 PCR检测试剂盒 由深圳市生科源技术有限公司提 1 A样结果报告 根据菌落形态特征、生化试验、 供；伤寒沙门菌50096、副伤寒乙沙门菌5009、福 血清学试验及双色实时荧光 PCR试验结果，综合 氏志 贺 菌 2a血 清 型 51573、大 肠 埃 希 菌 判定25g样品A中未检出沙门菌。 1．1 A样经前增菌、增菌、平板分离、生化试 ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923质控菌 株 由浙江省疾控中心提供。 验 结果 1．1．1 分离平板上菌落形态 XLD平板：大多为 1．3 主要仪器 ATB自动细菌鉴定仪 由生物梅里 埃有限公司提供，7500PCR仪器 由美 国ABI公司 黄色、中等大小、不透明的圆形菌落，少数为无色 半透明、中心黑色的圆形菌落。HE平板：绿色、 提供。 中等大小、中心