小麦过敏性反应诱导蛋白基因TaHIR3的功能分析.docVIP

  小麦过敏性反应诱导蛋白基因 TaHIR3 的功 能分析# 郭军1，段迎辉2，黄丽丽1，康振生1** 5 10 15 20 25 30 35 40 （1. 西北农林科技大学植保学院，旱区作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌 712100； 2. 西北农林科技大学生命学院，陕西杨凌 712100） 摘要：本研究在已克隆的小麦过敏性反应诱导蛋白基因 TaHIR3 的基础上，为进一步了解其 抗条锈病机制，对其进行了原核表达和亚细胞定位分析，并借助于病毒诱导的基因沉默技术 研究了其功能。原核表达获得了 TaHIR3 重组融合表达蛋白；亚细胞定位表明 TaHIR3 在细 胞质大量表达；BSMV-VIGS 分析表明小麦过敏性诱导基因 TaHIR3 在转录水平上的沉默， 能使水源 11 对 CYR23 的非亲和抗性反应呈一定水平下降。因此，TaHIR3 基因可能参与小 麦对条锈病的抗性反应，并且在抗锈病反应中起到一定的积极作用。 关键词：小麦；条锈病；TaHIR3 基因；病毒诱导的基因沉默 中图分类号：S432.1 Functional analysis of a hyhersensitive-induced reaction gene from wheat, TaHIR3 GUO Jun1, DUAN Yinghui2, HUANG Lili1, KANG Zhensheng1 (1. State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas and College of Plant Protection, Northwest AF University,712100; 2. College of Life Science, Northwest A F University, 712100) Abstract: To further elucidate the molecular mechanism of wheat TaHIR3 gene against stripe rust fungus, prokaryotic expression, subcellular location and VIGS (virus-induced gene silencing) were performed. The recombinant protein TaHIR3 were obtained and can be used for further investigation. Subcellualr location assay indicated TaHIR3 was localized in the cytoplasm of onion epidermal cells. BSMV-VIGS analysis indicated silencing TaHIR3 caused decreased of wheat resistance and a little uredinispores appeared on the wheat leaves, whereas infection with a control construct or one that silences phytoene desaturase had no effect on resistance or susceptibility. The results suggest that TaHIR3 plays a positive role in wheat defense against infection by stripe rust fungus. Key words: wheat; stripe rust; TaHIR3; VIGS 0 引言 植物在遭受病原物的侵袭时，会表现出一系列的抗病反应。其中，过敏性反 应（Hypersensitive Response）是植物抗病反应中常见的一种表现形式，通常认为 病原菌生长受到限制与植物细胞快速死亡直接相关[1-2]。HR 反应一般会诱导植物 系统获得抗性（Systemic Acquired Resistance, SAR）的产生[3-4]。因此，HR 在植 物对病原菌的防卫反应过程中起着重要的作用。 Karrer 等（1998）[5]首先从 TMV 侵染的烟草中克隆了到一些 cDNA，这些 基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金资助课题（200807121011）；国家自然科学基金 作者简介：郭军（1974-），男，副教授，主要研究方向：寄主与病原互作的分子机理及信号传导途径 通信联系人：康振生（1957-），男，教授，主要研究