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酶工程 概述 酶的催化特性和分类 酶的生产及分离纯化 酶分子修饰和固定化 酶反应器和应用 酶工程的现状和发展展望 第一节 概述 酶,可以说是一切生命活动的序幕,决定着机体内一切化学反应工程,是机体一切化学变化的激动者 酶学,无论从理论上讲还是从应用上讲,都是现代生物技术领域中一个十分重要的学科 在工业、农业、医药、环保等方面应用越来越广泛 1 人类对酶的认识过程 我国在四千多年前,就已经在酿酒、制酱过程中,不自觉地利用酶的催化作用 真正认识酶的存在和作用,是从19世纪开始的 1833年,payen和persoz首次发现淀粉酶,指出它的热不稳定性,初步触及酶的本质问题 19世纪中叶,pasteur等人对酵母的酒精发酵进行大量研究,指出酵母中存在一些使葡萄糖转化为酒精的物质 1878年,kunne首先把这种物质称之为酶,来自于希腊文,意思为“在酵母中” 1896年,buchner兄弟阐明了发酵时酶的作用的化学本质,因此获得1911年诺贝尔化学奖 1894年,fisher发现酶对底物的专一性现象,提出锁钥模型 summer于1926年从刀豆中提取了脲酶蛋白质结晶,从而确立了酶的化学本质是蛋白质的观点,为酶化学奠定基础,因此获得1947年诺贝尔奖 1969年,首次报道了由氨基酸单体化学合成牛胰核糖核酸酶 重组DNA技术用于酶学研究引起人们的高度重视 已经证实,用定点突变在指定的位点进行突变,可以改变酶的催化活性和专一性,有助于认识酶的作用机制 2 酶的定义 生物体内产生的具有催化功能的特殊蛋白质 核糖核酸酶 抗体酶 3 酶工程的研究内容 酶工程是现代生物技术的主要内容之一,是随酶学研究迅速发展,特别是酶的应用推广,是酶学和工程学相互渗透结合,发展而成的一门新的技术学科 从应用角度出发研究酶,是在一定的生物反应装置中利用酶的催化性质进行生物转化的技术,是生物技术的重要组成部分 酶工程是利用酶的催化作用进行物质转化的技术,是将酶学理论与化工技术结合而形成的新技术 酶工程包括酶的生产和应用两方面 酶工程的目的是为我们提供产品或以特定的功能来为我们服务 酶工程的主要任务是,通过预先设计,经过人工操作和控制而获得大量所需的酶,并通过各种方法使酶发挥其最大的催化功能,即利用酶的特定功能,借助工程学手段为我们提供产品或分解有害物质 酶工程的研究内容主要包括以下方面 酶制剂的分离、纯化、大批量生产及新酶开发 酶生产中基因工程技术的应用 酶的固定化技术 酶分子改造与化学修饰,以及酶结构与功能的研究 多酶反应器的研究与应用 酶抑制剂、激活剂的开发与应用研究 酶的应用性开发 模拟酶、合成酶及酶分子的人工设计、合成的研究 与其他生物技术领域的交叉和渗透 第二节 酶的催化特性和分类 一 酶是一类特殊的催化剂 具备一般催化剂的特性,即参与化学反应过程时可以改变化学反应的速度,但不改变化学反应的性质,即不改变反应的方向和平衡点。在反应前后,酶的组成和质量不发生变化 酶又是不同于一般催化剂的生物催化剂 特点 1催化效率高 在相同条件下,酶的存在可以使一个反应的反应速度大大加快。原因:酶可以极大地降低反应所需的活化能,酶催化是多种催化因素的协同作用 2专一性强 酶的专一性是指酶对它的催化对象有严格的选择性,即一种酶只催化一种或一类结构相似的底物进行某种类型的反应 绝对专一性 一种酶只能催化一种物质进行一种反应,这种高度的专一性称为绝对专一性,这种专一性包括酶对光学异构体的选择性,对几何异构体的选择性 相对专一性 一种酶能够催化一类结构相似的物质进行某种相同类型的反应,这种专一性称为相对专一性,包括基团专一性和键专一性 3酶活性可调节 生命是严格有序的,一方面这种有序过程依赖于酶的催化作用,另一方面,酶又必然受到这个有序过程的严格调控 酶的调控方式 酶浓度调节:诱导或抑制酶的合成,调节酶的降解 生理调节或激素调节:与生物合成有关,方式不同 共价修饰调节:通过酶催化进行(磷酸化) 酶原的活化:体内合成的非活化的酶的前体,在适当条件下,受到氢离子或特异性蛋白酶限制性水解,切去某段肽或断开酶原分子上某个肽键而转化为活性酶 共价调节 抑制剂的调节:酶的活力受到大分子抑制剂或小分子物质抑制 反馈调节:许多物质的合成是由一连串的反应组成,催化此物质合成的第一步的酶,往往可以被它的终端产物抑制 金属离子和其他小分子化合物调节 酶的区域化 多酶复合体 二 酶的分类: 氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂解酶、异构酶、连接酶或合成酶 第三节 酶的生产及分类纯化 一 酶的生产 酶工程研究的重要内容,酶作为生物催化剂普遍存在于动物、植物和微生物中。 广义上讲,一切生物体都可以作为酶的来源。 在实际中,对酶源的要求:酶含量丰富,提取、纯化方便 哺乳动物的胃提取胃蛋白酶 从无花果中提取
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