药学专业硕士毕业论文--人IL-15基因修饰NKL细胞系的生物学特性研究.docVIP

目 录 中文摘要 3 6 主要符号说明 9 文献综述 11 一、NK细胞的生物学功能 11 二、NK细胞系的建立及其在过继免疫治疗中的应用 12 三、IL-15在NK细胞发育分化中的重要作用 13 四、基因修饰NK细胞系的建立 14 参考文献 15 1 前言 20 2 材料和方法 21 2.1 主要实验材料 21 2.2 主要仪器设备 26 3 主要实验方法 27 4 实验结果 36 4.1 人IL-15基因修饰的NKL细胞系的建立 36 4.2 IL-15基因修饰对NKL细胞系增殖、凋亡和细胞周期的影响 36 4.3 IL-15基因修饰对NKL细胞系体外杀伤活性的影响 38 4.4 IL-15基因修饰的NKL细胞对裸鼠人肝癌移植瘤的抑制作用 39 5 讨论 40 附录 42 参考文献 52 攻读学位期间取得的研究成果 56 致 谢 57 TABLE OF CONTENTS Abstract (Chinese) ………………………… ………………..……………………..3 Abstract (English)…………………………………………………..……….………6 Symboly ……………………………………………………………….……………9 Review………………………………………………………………….…………..11 1 Biological function of NK cells…………….………………….……..………11 2 Establishment of the NK cell line …………………………..…...………12 3 Importance of IL-15 in the differentiation and development of NK cells……13 4 Establishment of gene-modified NK cell line…………………………...……14 References……………………………………………………………………….15 Research paper 1 Introduction……………………………………...…………………………………20 2 Materials and Methods…………………………..……...………………….………21 2.1 Reagents ………………………………..…………………………………21 2.2 Apparatus………………………………..……………….…………………26 3 Experimental methods ……………………………………………….…….……27 4 Results…………………………………………………………………..…………36 4.1 Establishment of the hIL-15 gene-modified NKL cells………………….…36 4.2 Improvement of proliferation and anti-apoptosis in the hIL-15 gene-modified NKL cell line ………………………………………………………...………………36 4.3 Enhancement of natural cytotoxicity against hepatocarcinoma in hIL-15 gene-modified NKL cells ……………………………………………………………38 4.4 Enhancement of natural cytotoxicity against hepatocarcinoma in hIL-15 gene-modified NKL cells in vivo…………………….……………………………39 5 Discussion …………………………………………………………………………40 Appendix……………………………………………………………………………..42 References……………………………………………………………………………52 Publications………………………………………………………………………………56 Acknowledgement………………………………………………………………………57 摘 要 目的 NK细胞作为机体固有免疫的重要组成部分是机体抗肿瘤、抗感染的第一道天然防线。MHC(组织相容性复合物)限制性。NK细胞不仅能够介导对肿瘤细胞的天然杀伤作用，还能够调节特异性和非特异性免疫应答。过继转输活化的或同种异体的NK细胞，已经应用于白血病和某些实体肿瘤的治疗中白细胞介素-15（IL-15）由细胞产生与IL-2在功能