重组酵母的淀粉乙醇直接发酵法工艺条件优化.docVIP

  重组酵母的淀粉乙醇直接发酵法工艺条件 优化# 郑阳阳，龚映雪，李晶博，肖文娟，林蒋海，刘泽寰** 5 10 （暨南大学生命技术学院分子生物学研究中心，广州 510632） 摘要：本研究对α-淀粉酶和糖化酶双基因重组酵母工程菌的乙醇发酵条件进行探讨，研究 了该菌株在糖蜜种子培养基中的出芽率、死亡率以及生长动力学，并通过正交试验对淀粉发 酵培养基成分以及发酵条件进行了优化，得出其最佳直接发酵条件为：将一级酵母种子接入 含初始淀粉 150 g/l 的最优发酵培养基中，接种量 10%，发酵 6d 后得到发酵液中乙醇体积 分数为 8.3%，乙醇转化率达到理论值的 78.1%。按照本文确定的乙醇直接发酵法工艺，利用 具有α-淀粉酶和糖化酶分泌能力的工程酵母对淀粉直接发酵生产乙醇，取得良好的效果， 具有重要的经济价值和社会意义。 关键词：发酵；重组酵母；乙醇；淀粉 中图分类号：TS262.2; Q815 15 Optimization of Direct Ethanol Fermentation Conditions from Starch with Recombinant Yeast ZHENG Yangyang, GONG Yingxue, LI Jingbo, XIAO Wenjuan, LIN Jianghai, LIU Zehuan 20 25 30 35 40 (College of Life Science and Technology, Jinan University, GuangZhou 510632) Abstract: In this paper, the direct ethanol fermentation process from starch using a recombinant strain of Saccharomyces cerevisiae co-expressing alpha-amylase and glucoamylase was studied. The budding rate, mortality rate and growth kinetics of yeast in molasses medium were investigated. Fermentation medium composition and process conditions were also optimized through Orthogonal Experiments. When the first order seed was inoculated to optimal fermentation medium containing 150 g/l of soluble starch by 10%, 8.3% (v/v) of ethanol was received after 6 days, approximate to 78.1% of the theoretical yield. It can be concluded that the direct fermenting process using our recombinant yeast established in this research got positive results and showed important economic value. Keywords: fermentation; recombinant yeast; ethanol; starch 0 引言 酿酒酵母能够将葡萄糖转化为乙醇，具有生长特性好、发酵效率高、乙醇耐受性强等优 点，是酒精工业生产中最常用的发酵菌种。但由于普通酿酒酵母缺乏水解淀粉的酶系，不能 直接发酵淀粉。因此，在传统酒精发酵工艺中，玉米、小麦、木薯、谷物等淀粉质原料需先 经过蒸煮、液化、糖化（添加酶制剂[1]）等工序水解成葡萄糖等可发酵性糖后才能被酵母代 谢转化成乙醇[2]。利用重组α-淀粉酶与糖化酶基因的工程酵母对淀粉进行直接发酵生产乙 醇，可以省略液化和糖化步骤，使淀粉水解与乙醇发酵同步进行，大大简化生产工艺与节能 降耗等，节约成本[3]。然而，重组酵母的发酵能力不仅与菌株的遗传特性有关，也与重组菌 的培养条件、发酵工艺的控制有密切联系。本文通过正交试验，针对本实验室构建的重组α -淀粉酶与糖化酶基因、具有直接淀粉发酵能力的基因工程菌株 AS2.489/pScAG，确定了发 基金项目：广州科技支撑计划（2009Z2-D521）；暨南大学引进优秀人才科研启动基金 作者简介：郑阳阳，（1988-），女，硕士，主要研究方向：基因克隆表达与生物乙醇发酵。 通信