高中生物选修1《专题5DNA和蛋白质技术》复习课件.pptVIP

专题5 DNA和蛋白质技术 2.PCR的反应过程 一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性→复性→延伸三步。学.科.网 zxxk. 3．PCR技术反应过程中控制不同温度的意义 (1)90 ℃以上时变性，双链DNA解聚为单链； (2)50 ℃左右时复性，两种引物与两条单链DNA结合； (3)72 ℃左右时延伸，TaqDNA 聚合酶促使DNA新链的合成。 1．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般要经历30多次下述循环：95 ℃条件下使模板DNA变性、解链→55 ℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述，不正确的是(　　) A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比，其所需要酶的最适温度较高 二、DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理 (1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低； (2)DNA不溶于酒精溶液； (3)DNA不被蛋白酶所水解；学.科.网 zxxk. (4)DNA可被二苯胺染成蓝色。 2．方法目的 (1)哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 (2)实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。 2．(2010年青岛模拟)下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是(　　) A．氯化钠的浓度越低，DNA的溶解度越大 B．人的血液不可代替鸡血进行该实验 C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 D．利用DNA易溶于酒精的特点可除去DNA中的部分杂质 3．向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是 (　　) A．减小；减小　　　 B．增大；增大 C．先减小后增大；增大 D．减小；增大 三、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理 2.实验操作程序 (1)样品处理 ①红细胞的洗涤：除去血浆蛋白等杂质，以利于后续步骤的分离纯化； ②血红蛋白的释放：使红细胞涨破，血红蛋白释放出来； ③分离血红蛋白溶液：经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来，便于下一步对血红蛋白的纯化。 相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，而相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，移动速度快，因此蛋白质分子彼此分离。 4．(2009年南京质检)下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是 (　　) A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动 5．玫瑰精油称为“液体黄金”，其提取方法() A．只能用水蒸气蒸馏法 B．可用蒸馏法和压榨法 C．可用蒸馏法和萃取法 D．可用压榨法和萃取法 【答案】　C (2009年高考江苏卷)下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有(双选) (　　) A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞 B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质 C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNA D．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化 1．(2008年江苏生物)下列叙述中错误的是(　　) A．改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出 B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色 C．用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质 D．用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质 2．(2008年山东理综)科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。 (1)分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。 (2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。 (3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的________，确定该蛋白质的抗菌效果。 (4)细菌培养常用的接种方法有__________和____________。实验结束后，对使