2013高考生物二轮复习精品教学案：专题14 现代生物科技（学生版）.docVIP

【2013考纲解读】 基因工程 (1)基因工程的诞生 I (2)基因工程的原理及技术 Ⅱ (3)基因工程的应用 Ⅱ (4)蛋白质工程 I 克隆技术 (1)植物的组织培养 Ⅱ (2)动物的细胞培养与体细胞克隆 I (3)细胞融合与单克隆抗体 Ⅱ 胚胎工程 (1)动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础 I (2)胚胎干细胞的移植 I (3)胚胎工程的应用 Ⅱ 生物技术的安全性和伦理问题 (1)转基因生物的安全性 I (2)生物武器对人类的威胁 I (3)生物技术中的伦理问题 I 生态工程(山东考纲不要求) (1)简述生态工程的原理 Ⅱ (2)生态工程的实例 I DNA的粗提取与鉴定 【知识网络构建】 【重点知识整合】 1．基因工程的基本工具 限制酶 DNA连接酶 (运)载体 切割目的基因和载体 拼接DNA片段形成 重组DNA 携带目的基因进入受体细胞 作用部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 ------------------ 作用特点 (条件) ①识别特定的核苷酸序列 ② ①E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端 ②T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平(口)末端 ①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 ②有一个或多个限制酶切割位点 ③具有特殊的标记基因 2．基因工程的操作步骤 (1) 目的基因的获取： ①从基因文库中获取。 ②利用PCR技术扩增。 ③用化学方法直接人工合成。 (2) 基因表达载体的构建： ①基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。 ②基因表达载体的构建方法： (3)将目的基因导入受体细胞： 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用 方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用Ca2＋处理) 受体 细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 (4) 目的基因的检测与鉴定： ①目的基因插入检测：DNA分子杂交。 ②目的基因转录检测：(核酸)分子杂交。 ③目的基因翻译检测：抗原—抗体杂交。 ④个体生物学水平检测：根据目的基因表达出的性状判断。 二 细胞工程 1．动物细胞培养与植物组织培养的比较 项目 动物细胞培养 植物组织培养 培养前处理 无菌、用胰蛋白酶处理，使组织细胞相互分散开 无菌、离体 培养基成分 葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素、动物血清等 矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素等 培养基状态 液体培养基 固体培养基 项目 动物细胞培养 植物组织培养 过程 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织→原代培养→传代培养→细胞群 离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽―→植物体 不能 能 举例 大规模生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；皮肤移植；检测有毒物质的毒性等 快速繁殖、培育无病毒植株；生产药物；制造人工种子；培育转基因作物等 2．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体的制备) 理论基础(原理) 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶等) 注射特定抗原，免疫小鼠，获取(效应)B淋巴细胞 促融 ①物理法：离心、振动、电激等；②化学法：聚乙二醇(PEG) ①物化法：与植物细胞融合相同；②生物法：灭活的仙台病毒 过程 第一步：原生质体的制备；第二步：原生质体的融合；第三步：杂种细胞的筛选与培养；第四步：杂种植株的诱导与鉴定 第一步：正常小鼠免疫