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1.(2012·浙江嘉江调研)如图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程,请回答:
→→→→
(1)A过程配制的是通用细菌培养基,称为______培养基。配制时除了加入特定的营养物质以外,还要加入一定量的氯化钠,以维持______。对培养基酸碱度的调节,应该在B过程的______(前面或后面)。
(2)D过程与C过程相比,培养基中增加的物质是______。E过程所需的温度是______。
(3)D过程后,一个菌体便会形成一个______,这种分离方法是______的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。
(4)植物组织培养时,先配制MS培养基,再加入一定比例的植物激素,当生长素相对较多时,可促进______。
(5)植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作,下列不适宜用高压蒸汽灭菌的是______。
A.接种环和镊子
B.三角瓶和广口瓶
C.发芽培养基和生根培养基
D.用于培养的幼茎和幼芽
解析:LB液体培养基是通用的细菌培养基,LB固体平面培养基则用于划线分离,氯化钠充当溶质的作用是维持培养基的渗透压,调整好酸碱度后才能进行灭菌,若灭菌后再进行调整酸碱度的话,又会产生新的污染。在液体培养基的基础上加入一定量的琼脂就成了固体培养基,培养好后的菌种置于4 ℃冰箱中保存。通过划线分离后,一个菌体就会繁殖出一个菌落。生长素多,有助于生根,而细胞分裂素多,则利于生芽。高压蒸汽灭菌常用于培养基、培养器材等的灭菌,而用于培养的幼茎和幼芽则不能进行任何的灭菌操作,否则会导致细胞死亡。
答案:(1)LB 渗透压 前面 (2)琼脂 4 ℃ (3)(单)菌落 消除污染杂菌(纯化菌种) (4)生根 (5)D
2.(2012·浙江绍江质检)研究人员测试新抗生素对某种链球菌杀菌效果,这种链球菌能引起人的咽喉感染,将此链球菌分别接种在三个培养皿中,在2号培养皿中放入一片浸过新型抗生素的圆片,3号作为对照,三只培养皿如图。
(1)请对本实验做出假设:__________________________________________。
(2)“细菌喜荤,霉菌喜素”,所以该细菌培养基一般用______来配制,制备培养基的操作顺序是______。(用下列字母排序)
a.倒置培养基 b.计算和称量 c.灭菌 d.调pH e.溶解和熔化
(3)为能彻底消灭培养基中的其他微生物,科学家研究出间隙灭菌法。其程序是:第一天,将培养基在100 ℃下维持30分钟,然后在35 ℃~37 ℃下放置24小时;第二天、第三天重复第一天的操作。请分析:
①培养基在100 ℃下维持30分钟的目的是______。
②在35 ℃~37 ℃下放置24小时后再加热的目的是______________________________。
③怎样证明间隙灭菌法的效果?______________________________。
(4)对照组培养皿3中的圆片应作怎样的处理?________________________________________________________________________。
(5)利用____________________________________________法对培养皿1进行该链球菌接种,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。待长出菌落后,利用无菌绒布将培养皿1中的菌落转移到培养皿2和3中,转移过程要注意________________________________________________________。
(6)三只培养皿都放在37 ℃的温度条件下培养24小时,其中1号培养皿的变化结果如图,在2号培养皿中画出假设的变化结果。
解析:题干中描述本题是为了测试新抗生素对某种链球菌的杀菌效果,所以可以假设成“新型抗生素能够抑制细菌的生长”,当然也可以假设“新型抗生素对细菌生长无影响”。细菌培养时要用蛋白胨和酵母提取物来配制,还要加入一定量的氯化钠,以维持一定的渗透压。配制培养基时,先计算和称量各种物质,再将其溶解和熔化成溶液,然后再调pH和灭菌,最后倒置培养基。灭菌最终目标是要杀灭或清除环境中的一切微生物(包括芽孢和孢子)。3号作为对照不需要加任何抗生素。采用印章法转移菌种时,绒布不能进行转动,才能确保细菌位置不变。若该新型抗生素对细菌生长有抑制作用,则抗生素的周围部位没有菌落的形成,其他部位仍有菌落。
答案:(1)这种新型抗生素对细菌生长无影响;或这种新型抗生素对细菌的生长有抑制作用
(2)蛋白胨和酵母提取物 bedca
(3)①杀死活的微生物 ②杀死24小时中由细菌芽孢萌发而生长的微生物 ③将培养基在37 ℃下放置3~5天,如果无微生物生长,则证明培养基已达到灭菌效果
(4)将圆片在不添加任何抗生素的无菌水中浸泡一段时间
(5)
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