各类标本的规范化处理.ppt

有意义的细菌浓度值（CFU/ml） 标本 有意义的浓度 CFU/ml 自然咳痰 107 诱导痰 不确定 气管内吸取物 106 支气管肺泡灌洗液 104 保护性毛刷 103 支气管灌洗液 不做培养 气管内吸取物 加等量的N-乙酰-L-半胱氨酸或溶痰剂 漩涡震荡30s 加0.01ml标本至1.0ml的TSB 每个平板涂0.01ml 血平皿 巧克力平皿 麦康凯平皿 1：100稀释 1：2稀释 生长出50个菌落 支气管肺泡灌洗液 将所有标本装入50ml离心管内 离心20min，混匀10ml沉淀液， 漩涡震荡30s 每个平板涂0.01ml 血平皿 巧克力平皿 麦康凯平皿 Use pipette. 用吸管吸取0.1ml至1mlTSB （1：10稀释） 生长出10个菌落 制作涂片（细胞离心) 保护性毛刷 将毛刷置于1ml稀释液中 震荡30s 每个平板涂0.01ml 血平皿 巧克力平皿 麦康凯平皿 生长出10个菌落 Use PRAS if anaerobic 若怀疑厌氧菌则使用PRAS 制作涂片（细胞离心) ⑥脓，吸取物或组织标本 主要病原菌：金黄色葡萄球菌，化脓链球菌，其他β溶血链球菌，铜绿假单胞菌，其他革兰阴性杆菌。 非病原菌：凝固酶阴性葡萄球菌，少量的棒状革兰阳性杆菌 用酒精消毒伤口 周围皮肤 最好的标本是吸取物和组织 最差的标本是拭子 #1 接种血平皿和麦康凯平皿 如果是吸取物或组织，进行革兰染色，将重要结果通知临床医生 #2 #3 铜绿假单 胞菌 中孵育48小时 #4 对1或2种 重要病原菌进行鉴定药 敏试验 金黄色葡萄球菌为主 β溶血链球菌 肺炎克 雷伯菌 混合的2种肠道革兰阴性 杆菌：2种均报告； 当检出3种或更多病原菌时，报告“混合菌群”并描述性列出假单胞菌，金葡菌，变形杆菌，肠道革兰阴性杆菌等。 ? Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution #5 ⑦咽部标本培养 主要病原菌：A群β溶血链球菌。 选择性报告：溶血隐秘杆菌 拭子擦取咽部和扁桃体。不要碰触舌头和面颊。 将拭子擦拭血平皿（羊血或马血）的1/5区域 在第一区贴相邻的两纸片：复方磺胺和杆菌肽 # 1 拭子 # 2 在烛缸中37° C孵育过夜并检查 平板；若阴性，继续孵育 过夜 总孵育时间＝48小时 # 5 # 3 分区画线3或4区 接种环 β溶血菌落， 0.5 mm, 对复方磺胺耐药，对杆菌肽敏感＝A群链球菌（触酶阴性） # 6 杆菌肽 SXT 纸片 # 4 杆菌肽 复方磺胺 PYR阳性可确证A群链球菌 # 7 ? Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution 不要报告 咽炎中非致病菌： 金黄色葡萄球菌 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌 卡他莫拉菌 α溶血链球菌 所有革兰阴性杆菌 所有酵母菌 报告结果： 1+ to 4+ A群β溶血链球菌 或 1+ to 4+ 非A群β溶血链球菌 或 未检出β溶血链球菌 # 8 # 9 #1 #2 常规：接种沙氏平皿和Mycobiotic培养基。 30° C 空气孵育四周。 对于皮肤癣菌：接种Mycobiotic和DTM培养基 组织，皮肤刮取物或指甲：将一小块完整的标本插入琼脂表面 #3 重要的真菌：组织活检，痰，脑脊液，血培养 皮肤癣菌：皮肤刮片，指甲刮片，根部的头发 不要研磨组织：使用解剖刀将其切成小块 #4 ⑧真菌培养 重要病原菌：新型隐球菌，人芽囊原虫 ，皮肤癣菌，和 其他真菌（考虑标本来源和病人情况） 拭子仅用于酵母菌的分离－接种血平皿和沙氏平皿 ? Ellen Jo Baron 2008; Use with proper attribution #6 将标本研于一滴10%KOH，加盖玻片后镜检真菌 接种后7天内每日观察平皿，之后每周两次 光滑菌落＝酵母菌 毛状菌落＝丝状真菌 用通气胶带粘贴平皿的侧面或两边 #5 #1 b a b ⑨Urine Culture尿培养 主要病原菌：大肠埃希菌，变形杆菌，克雷伯菌，其他革兰阴性杆菌，肠球菌，腐生葡萄球菌，纯的金黄色葡萄球菌 #2 接种血平皿和麦康凯平皿 #3 空气孵育24小时 收集中段尿 a #4 菌落计数 0.001ml接种环 若? 2 种菌生长，对每种菌进行鉴定和药敏试验； 若2种菌生长，报 告“混合菌群” #5 注意: 革兰阴性杆菌在血平皿和麦 康凯平皿上均生长良好 革兰阳性球菌仅在血平皿上生长良好 GNR #6 75,000 cf