NGF和LIF调节淋巴细胞表达IL-4、IL-5的初步探讨.pdfVIP

NGF 和和 LIF 调节淋巴细胞表达调节淋巴细胞表达 IL-4 、、IL-5 的初步探讨的初步探讨 和和 调节淋巴细胞表达调节淋巴细胞表达 、、 的初步探讨的初步探讨 摘摘 要要 摘摘 要要 研究目的研究目的： 研究目的研究目的 利用细胞培养技术，通过外源性神经生长因子 （NGF）、白血病抑制因子 （LIF） 干预，在mRNA和蛋白水平上分析NGF、LIF对正常大鼠和哮喘大鼠脾淋巴细胞中白 细胞介素-4 （IL-4）和白细胞介素-5 （IL-5）表达水平的影响，探讨NGF、LIF在 哮喘气道复杂的神经源性炎症反应和免疫源性炎症反应中的桥梁作用，目的是从 细胞水平上探讨哮喘免疫系统干预治疗的理论依据。 方法方法： ： 方法方法：： 1.16只大鼠随机分为对照组(A组)8只，哮喘组(B组)8只，其中B组采用卵蛋白和氢 氧化铝腹腔内注射致敏，两周后予1%卵蛋白雾化吸入激发哮喘，每天1次，每次30 min，连续14d；A组予等量生理盐水代替卵蛋白腹腔内注射及雾化激发，其余处理 同B组。 2.予（1%卵蛋白/生理盐水）雾化吸入2周后，24小时内体外分离培养对照组大鼠 和哮喘组大鼠脾淋巴细胞。 3.以IL-4和IL-5作为对照大鼠和哮喘大鼠Th2淋巴细胞免疫失衡的主要观测指标， 通过RT-PCR半定量法和ELISA法测定两组大鼠脾淋巴细胞表达Th2细胞因子IL-4、 IL-5mRNA转录水平和分泌蛋白的基础水平，观察予外源性NGF和LIF体外干预后淋 巴细胞IL-4和IL-5表达随干预浓度的变化。 结果结果： ： 结果结果：： 1.哮喘组IL-4、IL-5mRNA表达及蛋白水平较对照组明显增强 （ P 0.05） 2.在外源性NGF、LIF不同浓度的干预下，IL-4、IL-5mRNA和蛋白表达量分别比前 一梯度低浓度干预组有显著升高(P 0.05)，提示NGF、LIF上调IL-4、IL-5mRNA表 达和蛋白分泌并呈浓度依赖性。 结论结论： ： 结论结论：： 1.在哮喘大鼠中，NGF、LIF与Th2类细胞因子免疫失衡密切相关。 2.在哮喘大鼠中，NGF、LIF可能通过上调哮喘Th2类细胞因子IL-4、IL-5mRNA表达 和蛋白分泌，参与促进和放大哮喘Th2类细胞因子免疫失衡效应。 关键词关键词： 哮喘： ；神经生长因子；白血病抑制因子；白细胞介素4； 白细胞介素5； 关键词关键词：： I Th2 I The study of expression of IL-4 and IL-5 in SD rats’ lymphocytes with NGF and LIF Abstract Objective: By cell culture technique, the splenic lymphocytes from the control rats and asthmatic rats were isolated and cultured with different dose NGF/LIF. （leukemia inhibitory factor/ nerve growth factor ）; The expressions of IL-4 and IL-5 mRNA in the splenic lymphocytes were respectively detected by RT-PCR, and the secretions