【赢在课堂】高中生物 课时训练14 血红蛋白的提取和分离 新人教版选修1.docVIP

课题3　血红蛋白的提取和分离 课时训练14　血红蛋白的提取和分离 1.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为下图中(　　)。 解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。 答案:B 2.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于(　　)。 A.电荷的多少　　　　　　 B.分子的大小 C.肽链的多少 D.分子形状的差异 解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。 答案:B 3.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是(　　)。 A.防止血红蛋白被氧气氧化 B.血红蛋白是一种碱性物质,需磷酸中和 C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和性质 解析:磷酸缓冲液的作用是稳定pH,从而维持血红蛋白的结构和性质。 答案:D 4.蛋白质的提取和分离分为哪几步?(　　) A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化 C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定 解析:蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。A中凝胶色谱操作及SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。 答案:C 5.关于凝胶色谱柱的装填,除哪项外均为正确解释?(　　) A.交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值 B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装 C.用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h D.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液 解析:本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装;在洗脱过程中,应在约50 cm高的操作压下,用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h,以使凝胶装填紧密;凝胶溶胀时,应使用蒸馏水将其充分溶胀,制成凝胶悬浮液。 答案:D 6.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、电荷的性质和电荷量情况如下图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是(　　)。 A.若将样品以2 000 r·min-1的速度离心10 min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中 B.若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快 C.将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内 D.若用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远 解析:若用离心法分离蛋白质,则相对分子质量大的分子先沉淀下来,即丙在沉淀中。若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则相对分子质量越小,移动越慢,即甲的移动速度最慢。将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则相对分子质量更大的丙也保留在袋内。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素,据图无法判断五种蛋白质在凝胶上的电泳带距离;为消除净电荷对迁移率的影响,可在凝胶中加入SDS使电泳的迁移率完全取决于分子的大小。 答案:C 7.下面说法不正确的是(　　)。 A.在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变 B.缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成 C.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 D.透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内 解析:透析袋一般是用硝酸纤维素(又叫玻璃纸)制成的。透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。 答案:D 8.下列试剂可用于血红蛋白释放的是(　　)。 ①生理盐水　②甲苯　③磷酸缓冲液　④蒸馏水 ⑤柠檬酸钠 A.②④ B.①④ C.④⑤ D.①③ 解析:在蒸馏水中红细胞吸水胀破,甲苯作为有机溶剂能够溶解细胞膜,加速细胞的破裂。 答案:A 9.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2和部分CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。 (1)将实验流程补充完整:A为　　　　,B