新型软骨脱细胞基质海绵的制备及生物相容性评价.pdfVIP

1002 Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, August 2009, Vol. 23, No.8 · · 新型软骨脱细胞基质海绵的制备及生物相容性评价 刘天军 谭波 罗静聪 邓力 解慧琪 【摘  要】 目的 探讨利用猪耳软骨脱细胞基质制备海绵状多孔支架材料的方法，及其用作组织工程关节软骨支 架材料的可行性。  方法 取新鲜猪耳软骨低温粉碎后，筛取粒径90 μm 以下软骨微粒经低温脱细胞处理，冻干，用1.5% 乙酸分散制备质量体积比为2% 的胶状悬液，低温冻干成型。行理化性能检测测定其孔径、孔隙率及吸水率，并行组织学 及扫描电镜观察。24 只SD 大鼠脊柱两侧皮下分别植入制备的软骨脱细胞基质海绵（实验组）和Col Ⅰ海绵（对照组）；于 术后1、2 、4 、8 周取材行组织学观察，分析软骨脱细胞基质海绵在体内的吸收降解情况。取1 周龄新西兰大白兔股骨骨髓， 培养获取第3 代BMSCs ，分别采用浓度为50% （A 组）及100% （B 组）的软骨脱细胞基质海绵浸提液及DMEM 培养液 （C 组）进行培养，于培养后2 、4 、6 d MTT 法测定细胞增殖。  结果 制备的软骨脱细胞基质海绵呈白色多孔状，组织学 观察示材料中无软骨细胞碎片残留，主要由胶原构成。扫描电镜显示材料呈多孔蜂巢状，孔洞相互连接，孔径均匀。吸水 率为2 029% ± 253% ，孔径为（90.66 ± 21.26 ）μm，孔隙率为90.10% ± 2.42% 。支架材料植入SD 大鼠皮下后可见组织长入 材料，血管生成，炎性反应较对照组轻，材料可按一定速率降解吸收。MTT 法检测结果示，浸提液培养2 、4 d ，3 组间吸光 度（A ）值差异无统计学意义（P 0.05 ）；6 d，3 组间比较差异均有统计学意义（P 0.05 ）。  结论 将软骨脱细胞基质进 行改性处理制备的海绵支架材料脱细胞彻底，保留了软骨ECM 主要成分，无毒，具备合适的孔径和孔隙率，孔隙分布均匀， 生物相容性好，可作为软骨组织工程的支架材料。 【关键词】 软骨组织工程 软骨脱细胞基质海绵 支架材料    生物相容性 中图分类号： R318.08 Q813 文献标志码：A PREPARATION AND BIOCOMPATIBILITY EVALUATION OF NOVEL CARTILAGE ACELLULAR MATRIX SPONGE/LIU Tianjun, TAN Bo, LUO Jingcong, DENG Li, XIE Huiqi. Division of Stem Cell and Tissue Engineering, State Key Laboratory of Biotherapy, West China Hospital, Sichuan University, Chengdu Sichuan, 610041, P.R.China. Corresponding author: XIE Huiqi, E-mail: xiehuiqi@163.com 【Abstract 】 Objective To explore the method of preparing spongy and porous scaffold materials with swine articular cartilage acellular matrix and to investigate its appl icabil ity for tissue engineered articular cartilage scaffold. Methods Fresh swine articular cartilage was freeze-dried and fr