鸡新城疫病毒F 基因与鸡白介素-2 (IL-2) 基因在真核载体中串连表达及免疫原性.pdfVIP

Online system: http://www.j 农业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2012, 20(11): 1327~1332 DOI: 10.3969/j. issn.1674-7968.2012.11.013 研究报告 An Letter 鸡新城疫病毒F 因与鸡白介素-2(IL -2)基因在真核载体中串连表达及 免疫原性 1 2 1 1 1 1 1 1* 亓丽红 朱剑英 艾武 黄兵 于可响 刘涛 秦卓明 宋敏训 ， 1 山东省农业科学院家禽研究所，山东省禽病诊断与免疫重点实验室，济南 250023；2 济南市畜产品质量安全监测中心 济南 250000 ， * 通讯作者 mxsong@ 要 为了探索鸡白介素-2(IL-2)对鸡新城疫病毒(NDV)F 蛋白免疫效果的增强作用，本研究通过重叠 延伸PCR 技术(SOE-PCR)利用连接子(G SG S)将鸡IL -2 基因和鸡NDV F 因串连，克隆至真核表达载 2 3 体pcDNA3.1 (+)，构建了表达质粒pcDNA-IL -2-F。通过脂质体介导DNA 瞬时转染法，将重组质粒 ， ， pcDNA-IL -2-F 和pcDNA-F 分别转染鸡胚成纤维细胞 Western blot 验证表明 pcDNA-IL -2-F 和pcDNA-F 均能瞬时表达F 蛋白，表达蛋白分别为76.0 和59.6 kD ，表达蛋白的大小与预期一致并具有抗原性。将表 达质粒免疫SPF 鸡，6 d 后开始用ELISA 方法检测NDV 的特异抗体，免疫20 d 后，用F48E9 进行攻毒。 结果显示，免疫pcDNA-IL -2-F 的鸡群产生的抗体水平(P 0.05)高于混合免疫pcDNA-IL -2 和pcDNA-F， 高于免疫pcDNA-F 的鸡群，但比免疫Lasota 组的抗体水平要低。攻毒试验说明免疫pcDNA-IL -2-F 组比 免疫其他质粒组保护率高，这说明串连表达的免疫效果要 于二者的联合使用，为病毒病疫苗的研制提 供了思路。 ， ，增强免疫效果 关键词 新城疫病毒(NDV) ，F 基因 鸡白介素(IL-2) ，串连真核表达 Tandem-expressing of Newcastle disease virus F and Chicken Interleukin-2 (IL -2) Genes in Eukaryotic Expression Vector and Their Immunogenicity QI Li-Hong1 ZHU Jian-Ying2 AI Wu1 HUANG Bing1 Yu Ke-xiang1 LIU Tao1 QIN Zhuo-Ming1 SONG Min-Xun1* 1 Institute of Poultry Science, Shandong Academy of Agricultural Science, Key Laboratory of Diagnosis and Immunity of Poultry Diseases, Shandong Province,