亮绿2脱氧核糖核酸作用的共振光散射增强研究.pdfVIP

( ) 第 29 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 3 期 　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2001 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 271～275 溴代十六烷基三甲基铵敏化亮绿脱氧核糖核酸作用 的共振光散射增强研究 1 2 1 1 黄新华 　舒为群 　李原芳 　黄承志 1 ( ) 2 ( ) 西南师范大学环境化学研究所 , 重庆 400715 　 第三军医大学环境卫生教研室 ,重庆 400038 ( ) 摘 　要 　首次报道在表面活性剂存在下阳离子染料与脱氧核糖核酸 DNA 作用所导致的共振光散射增 ( ) ( ) 强 RLSE 。在pH 10. 4 ～11. 8 和离子强度低于 0. 050 mol/ L 的条件下 ,亮绿 BG 与 DNA 作用产生 398. 0 ( ) 和 467. 2 nm 的特征 RLSE 信号 , 而溴代十六烷基三甲基铵 CTMAB 进一步敏化该 RLSE 信号。受 CTMAB 敏化的 RLSE 信号与 0～1. 2 mg/ L 的 ctDNA 和 fsDNA 呈正比 ,检测限低于 5 mg/ L 。方法成功应用 于合成样中 DNA 的测定。 关键词 　亮绿 ,脱氧核糖核酸 ,溴代十六烷基三甲基铵 ,共振光散射增强 1 　引　　言 在人类基因组计划的实施过程中产生了许多基因变异的测定方法 , 对诠释复杂的生物化学问题和 分子疾病诊断具有强烈的推动作用 〔1 ,2〕。在建立这些方法的过程中 , 从核酸到有机染料的共振能量转 ( ) 〔3 〕 〔4 〕 〔5 〕 移 resonance energy transfer 在发光分子设计 、免疫分析 和 DNA 芯片研制 过程中发挥了重要的作 用。与分子共振能量转移所导致的荧光增强一样 ,有机染料在生物大分子表面组装或聚集所导致的共 ( ) 〔6～8 〕 振光散射增强 RLSE 同样适用于生物大分子的灵敏监测 。已有的研究表明 , 有机染料与核酸作用 如果有 RLSE 产生 , 就意味着染料结合在核酸分子的表面。如果染料分子是嵌入在核酸分子的碱基对 之间 ,会微弱的增加核酸分子的长度和粘度 , 而不至于带来 RLSE 〔9 ,10 〕。因此 ,RLSE 不仅用于生物大分 子的灵敏测定 , 同时也是有机染料与核酸作用机理研究的有益补充。 表面活性剂在人们的生产和生活中占有十分重要的地位。但受表面活性剂污染的水会产生异味