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GE Healthcare
Life Sciences
Application Note IN Cell Analyzer 2000
IN Cell Analyzer 2000分析干细胞克隆
关键词：◎干细胞 ◎克隆分析 ◎成像细胞分析仪 ◎IN Cell Anaryzer 2000 ◎整孔成像
前言 使用的产品
通过干细胞研究，可以加深对于各种疾病的理解，获得很 IN Cell Analyzer 2000 Large Camera System
多有关治疗方法的知识。干细胞具有分化成各种表型的能 用于获取细胞图像 （配置大芯片CCD相机）
力 （全能性），其分化潜能在很大程度上依赖于培养条 IN Cell Investigator Software ，图像分析软件
件。为了优化培养条件，有必要在多孔板中进行研究。 IN Cell Analyzer 2000 2 ×0.1 NA物镜
在这方面，全自动荧光显微成像细胞分析仪可以高效工
作。贴壁细胞不需要消化分离；不仅能够从各个细胞获得 样本及试剂
荧光强度的信息，还能获得形态信息；可以检索数据得到
•干细胞及饲养细胞＊
定位信息；还能根据形态信息区别未分化的细胞及分化的
•Hoechst
细胞。
•荧光标记抗Oct4抗体
干细胞通常生长为致密的克隆，Oct-4是干细胞特异的分
•Texas red标记抗phospho-histone H3抗体
子标志，用Oct-4抗体检测干细胞克隆。使用多孔板进行
*数据由加州大学Irvine分校干细胞研究中心的Peter Donovan博士提供。
克隆分析时，试验人员既不希望视野边缘分割克隆，也不
※Hoechst是对细胞核进行染色的荧光试剂。荧光标记抗Oct4抗体是针
希望遗漏频率低的克隆，因此需要仪器能够一次整孔成 对干细胞分子标记Oct4特异性抗体，用于识别干细胞。Texas red标记
像。 抗phospho-histone H3抗体是针对细胞分裂时磷酸化组蛋白H3特异性抗
体，用于检测有丝分裂细胞。
本文介绍使用IN Cell A nalyzer 2000进行干细胞克隆分析
实例，IN Cell A nalyzer 2000将大芯片CCD相机与2倍物镜
实验方法
（0.1 NA ）组合起来，能够以高通量进行全孔拍摄。全自
动分析包括：自动识别饲养细胞与干细胞克隆，细胞计 9 6 孔板培养的干细胞克隆及饲养细胞被荧光染色和固
数、克隆计数、克隆中细胞数量的统计，还能对有丝分裂 定。细胞核用Ho e c hst 进行染色，干细胞用荧光标记抗
中的M期细胞进行识别。 Oct4抗体染色，有丝分裂中 （M期）的细胞用Texas red标
记抗 phosph
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