HCVNS3蛋白肝细胞中ERK与NFκB研究.pdfVIP

中南大学学报（医学版） 　２００７，３２（２） ＪＣｅｎｔＳｏｕｔｈＵｎｉｖ（ＭｅｄＳｃｉ） ２５９ ① 表达ＨＣＶＮＳ３蛋白肝细胞中ＥＲＫ与ＮＦＢ κ 信号转导通路间的ｃｒｏｓｓｔａｌｋ研究 郭　慧，冯德云，李　波，何琼琼，孙树艳，程瑞雪 （中南大学基础医学院病理学系，长沙４１００７８） ［摘要］　 目的：研究表达丙型肝炎病毒非结构蛋白３（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｐｒｏｔｅｉｎ３，ＨＣＶ ＮＳ３）的肝细胞中细胞外信号调节激酶（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ，ＥＲＫ）与核因子 Ｂ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃ κ ｔｏｒ Ｂ，ＮＦＢ）信号转导通路间的ｃｒｏｓｓｔａｌｋ。方法：真核表达质粒 ｐｃＤＮＡ３．１ＮＳ３转染人源永生化肝细 κ κ 胞系ＱＳＧ７７０１，建立稳定表达 ＨＣＶＮＳ３蛋白的细胞株 ＱＳＧ７７０１／ＮＳ３。在丝裂原活化蛋白激酶的激酶 （ＭＡＰｋｉｎａｓｅｋｉｎａｓｅ，ＭＥＫ）抑制剂 ＰＤ９８０５９（０，３０，５０，１００ ｍｏｌ／Ｌ）处理细胞 ＱＳＧ７７０１／ＮＳ３前后，利用 μ Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹检测 ＥＲＫ的磷酸化水平及细胞周期素 Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎＤ１）蛋白的表达；凝胶电泳阻滞迁移 试验检测转录激活因子 １（ａｃｔｉｖａｔｏｒｐｒｏｔｒｉｎ１，ＡＰ１）、ＮＦＢ等转录因子活性的改变；流式细胞术检测细 κ 胞周期各期百分数的改变；ＭＴＴ比色法观察其对细胞增殖的影响。结果：ＨＣＶＮＳ３蛋白能上调 ＱＳＧ７７０１ 细胞的 ＥＲＫ磷酸化水平及 ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达水平；ＰＤ９８０５９抑制 ＨＣＶＮＳ３蛋白介导的细胞增殖，下调 ＡＰ１和 ＮＦＢ的活性及 ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达。结论：在表达 ＨＣＶＮＳ３蛋白的肝细胞中，ＥＲＫ抑制剂能抑制 κ 肝细胞增殖，并呈明显的剂量依赖关系。ＥＲＫ与 ＮＦＢ信号转导通路间可能存在 ｃｒｏｓｓｔａｌｋ，并在肝细胞 κ 的增殖和恶性转化中发挥协同作用。 ［关键词］　 丙型肝炎病毒；　信号交流；　肝细胞；　信号转导 ［中图分类号］　Ｒ３６　　［文献标识码］　Ａ　　［文章编号］　１６７２７３４７（２００７）０２０２５９０５ ＣｒｏｓｓｔａｌｋｂｅｔｗｅｅｎＥＲＫａｎｄＮＦＢｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｓ κ ｉｎｔｈｅｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｐｒｏｔｅｉｎ３ ＧＵＯＨｕｉ，ＦＥＮＧＤｅｙｕｎ，ＬＩＢｏ，ＨＥＱｉｏｎｇｑｉｏｎｇ，ＳＵＮＳｈｕｙａｎ，ＣＨＥＮＧＲｕｉｘｕｅ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢａｓｉｃＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００７８，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｃｒｏｓｓｔａｌｋｂｅｔｗｅｅｎｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ （ＥＲＫ）ａｎｄｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ（ＮＦＢ）ｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｓｉｎｔｈｅｈｅ