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生物工程学报 Chin J Biotech 2009, August 25; 25(8): 1151- 1159
journals .im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061
cjb@im.ac.cn © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved
工业生物技术
颗粒状甲烷单加氧酶异源表达方法
1* 2* 1 1 1 1 2 1
韩冰 , 苏涛 , 杨程 , 江皓 , 吴昊 , 张翀 , 李信 , 邢新会
1 清华大学化工系生物化工研究所, 北京 100084
2 中国农业科学院研究生院, 北京 100081
摘 要: 由于甲烷氧化菌只能利用甲烷作为唯一的碳源和能源, 存在生长缓慢、细胞密度低、培养困难等问题, 限制了
其工业应用。解决该问题的有效途径之一是在容易实现高密度培养的异源宿主菌中表达甲烷单加氧酶(Methane
monooxygenase, MMO) 。本实验室前期首次在一种红球菌中成功地表达了来自于甲烷氧化菌(Methylosinus
trichosporium)OB3b 的 pMMO(颗粒状甲烷单加氧酶), 但比酶活较原始菌低很多。本实验在该结果的基础上, 通过选用
不同的启动子和宿主细胞探索表达 pMMO 的可能性, 结果得到了具有氧化甲烷活性的重组菌, 但是产物检测到乙醇的
生成, 且该重组菌的 pMMO 活性不稳定, 暗示pMMO 的催化特性可能发生了变化。另外, 很多重组菌检测到pMMO 蛋
白的表达, 但没有催化活性, 说明 pMMO 在宿主细胞中的正确组装是其功能表达的关键。
关键词: 甲烷氧化菌, 颗粒状甲烷单加氧酶, 异源表达, 生物催化
Heterologous expression of particulate methane
monooxygenase in different host cells
1* 2* 1 1 1 1 2 1
Bing Han , Tao Su , Cheng Yang , Hao Jiang , Hao Wu , Chong Zhang , Xin Li , and Xinhui Xing
1 Institute of Biochemical Engineering , Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing 100084, China
2 Graduate School of Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
Abstract: Methanotrophs use methane as the sole carbon and energy sou
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