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探究课题：生物组织中蛋白质的鉴定 一、课题分析 1．教学目标 （1）初步学会的鉴定方法2）探索该实验的最佳实验材料及稀释浓度，培养学生的科学素质和创新意识。 （3）如实观察并记录实验现象和结果，提高学生的实验操作能力和观察能力，u2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。反应式如下： 但双缩脲反应不仅为含有两个以上肽键的物质所有。含有一个肽键和一个－CS－NH2，－CH2－ NH2 NH2 NH2，－CRH－NH2或－CHOH－CHNH2等基因的物质以及乙二酰二氨 （O＝C－C＝O）等物质也有此反应。因此，一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。 双缩脲试剂常常用于组织蛋白质的定性测定（如图）。 二．材料器具 1．实验材料：大豆、黄豆、鸡蛋、豆浆等， 稀释2倍～10倍的蛋清等）。 2．仪器：双面刀片，研钵，石英砂，玻璃漏斗，试管夹纱布烧杯 三．教学建议 本课题的重点是初步学会的鉴定方法鉴定的方法 （2）用现成的食用豆浆、牛奶作实验材料。 （3）制备不同浓度的蛋清稀释液 取一个鸡蛋，用镊子在一端轻轻敲破一小块蛋壳，用吸管从蛋壳的破孔处吸取0.5mL蛋白液滴入若干个小烧杯中，分别向小烧杯中加入0、2.5mL、5mL、7.5mL、10mL水，搅拌均匀，加以稀释。 让学生思考：你认为哪些材料可以作该实验的材料？ 让学生试一试：浸泡与未浸泡的种子进行实验操作，效果一样吗？ 让学生思考：事先需要留出一些黄豆组织样液的目的是什么？ 让学生仔细观察：黄豆组织样液的颜色是怎样的？ 让学生思考：把蛋清稀释成不同浓度的设计目的是什么？ 让学生仔细观察：蛋清组织样液的颜色是怎样的？ 设疑3：蛋白质鉴定的实验如何操作？要注意些什么？ 步骤：①取1支试管，向试管内注入黄豆组织样液2mL（或者向1支试管内注入豆浆、或牛奶、或蛋白稀释液2mL）。②向试管中加入双缩脲试剂A（质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液），摇荡均匀。注意观察试管内溶液的颜色有什么变化。③再向试管中加入3～4滴双缩脲试剂B（质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液），摇荡均匀。 试管内溶液的颜色有什么变化 试管内溶液的颜色有什么变化 试管内溶液的颜色有什么变化 步骤之三 实验结果的讨论及小结 在教师指导下，让学生们大胆讨论，自己总结实验经验，得出结论。 让学生思考：双缩脲试剂A和双缩脲试剂B的用量及加入的顺序可以改变吗？若加入的顺序颠倒，请预测结果会怎样？ 让学生生试一试：用豆浆、牛奶、蛋清等做实验，结果是否一样？用稀释不同浓度的蛋清做实验，哪一浓度效果最好？ 让学生生试一试：把加入的双缩脲试剂A和双缩脲试剂B顺序颠倒，结果怎样？ 让学生想一想：设置对照组2的目的是什么？ 实验所得结论参考：①实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织（或器官），植物材料常用大豆、黄豆，动物材料常用的是鸡蛋（卵白）。如用大豆、黄豆，必须提前浸泡1～2d。这样容易研磨成浆（豆浆的实验效果也不错，因此有条件的学校，可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆，豆浆可以购买，也可以用小型的榨汁机制）。②用蛋清做实验必须经过稀释，如蛋清液稀释不够，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净。③双缩脲试剂A和双缩脲试剂B的加入的顺序不可以改变。因为蛋白质只有在碱性环境中才能与CuSO4发生紫色反应，否则紫色反应会被Cu(OH) 2遮蔽。 让学生反思：这次探索实验的心得。 五．讨论与思考 1．在实验中，最后的实验结果紫色反应不明显，试管内溶液的颜色还是呈现CuSO4的蓝色，这是为什么？ 简析：这是因为双缩脲试剂B（质量浓度为0.01g/mL的蓝色CuSO4溶液）加得过多。 2．如何稀释蛋清才能取得较好的实验效果？ 简析：在蛋白质的鉴定实验中，若用蛋白质作实验材料，必须稀释，以免实验后粘住试管，不易洗刷。方法：将鸡蛋一端轻轻敲破一小口，让蛋清流入容器中，然后按比例蛋清∶蒸馏水＝1∶9的比例混合搅匀，再用4层纱布过滤，放入滴瓶备用，这样配出的蛋清稀释液与双缩脲试剂发生反应后不会粘固在试管的内壁上，反应也彻底，试管也易刷洗干净。 3．对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是 ( ) A．都含有NaOH溶液和CuSO4溶液 B．斐林试剂的配制是将4～5滴0.05