新型明胶球脑动脉及肾动脉栓塞的初步动物实验研究.pdf

中文摘要 目的 评价新型仿生纳米壳聚糖－胶原（ nano Chitosan-Sodium Collagen, Nano-CS-COL ）支架与 Sprague-Dawley (SD) 大鼠骨髓基质干细胞（Bone mesenchymal stem cells, BMSCs ）的体外相容性。体外构建组织工程骨并植入动 物体内，以评价修复节段性胫骨缺损的效果，初步探讨治疗骨缺损的新组织工程 学方法。 方法 本课题应用骨组织工程原理，将骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行体外扩增， 然后种植在纳米复合材料上，加入成骨诱导液，观察种子细胞在复合材料上的生 长情况以及与材料的生物形容性，体外形成组织工程骨后进而进行 SD 大鼠胫骨 骨缺损的修复。 分离培养 SD 大鼠 BMSCs ，对细胞表面抗原进行检测；相差显微镜观察细胞 形 态 。 聚 电 解 质 共 凝 聚 技 术 (Polyelectrolyte complex coacervation) 制 作 nano-CS\COL 支架，取生长良好的 P3 代细胞，与 nano-CS\COL 支架体外联合诱 导培养，通过细胞粘附率、生长曲线、细胞活力、周期、细胞Ⅰ型胶原染色、扫 描电镜观察综合评价材料与细胞的相容性。将 Nano-CS-COL/BMSCs 复合物种植 入大鼠的胫骨缺损内，术后 6、12 周进行标本的大体观察、X 线放射学、组织学， 对比实验组与对照组、空白组骨缺损修复情况 结果 BMSCs 可在体外分离扩增，表达 CD29、CD44 和 CD106，不表达 CD34 和 CD45，细胞形态为长梭形，nano-CS\COL 平均孔径为 150 μｍ，与BMSCs 有较 好的相容性。 术后 6、12 周实验组与实验对照组放射学检查评价新骨生成有显著性差异( P 0.05) 。术后组织学检查新骨生成速度、生成量均有显著性差异。实验组完全 修复骨缺损，对照组部分修复，空白不能自行修复骨损, 最后缺损由纤维组织充 填。 结论 I 1．BMSCs 可在体外长期、稳定培养；是理想的组织工程种子细胞；nano-CS\COL 与 BMSCs 有良好的相容性 2 ．BMSCs/nano-CS-COL 复合物植入修复鼠胫骨缺损能够加速新骨形成, 可以达 到修复骨缺损的目的。 关键词 BMSCs ；壳聚糖；相容性；骨缺损；纳米；仿生 II ABSTRACT Objective To investigate the in vitro histocompatibility of nano-CS/COL; then explore a new method to repair the bone defect with tissue engineering bone. Methods Nano-CS/COL scaffold was prepared by polyelectrolyte confocal laser-scanning microscopy. The well-grown cells of the third passage were co-cultured in vitro on the nano-CS/COL scaffold. Taking simple nano-CS/COL scaffold material as control, the histocompatibility of scaffold material and cells were comprehensively evaluated by cell adherence rate, growth curve, cell activity and cycle, and scanning electron microscope observation. 1．BMSCs were isolated from SD rats and cultured. 2 ．