植物开放式组织培养探究探究.pdfVIP

维普资讯 山东农业大学学报 (自然科学版 )，2004，35 (4)：529～533 JournalofShandongAgricultumlUniversity(NaturalScience) 植物开放式组织培养研究初探 崔 刚 ，单文修 ，秦 旭 ，孙仲序 (1．山东农业大学园艺科学与工程学院 ．山东 泰安 271018；2．山东省农业厅 ，山东 济南 250014) 摘要：本试验旨在探索并建立一种植物开放式组织培养模式 ，使植物组织培养脱离严格无菌的操作环境 ．在 自然 、 开放的有菌环境中进行操作 ，从根本上简化组培环节 ，降低组培成本。实验证 明，通过抑生素的应用 ．不用高压灭 菌和超净工作台接种 ，在不影响组培效果的情况下 ，能够将污染率控制在 10％以下的可接受范围内。 关键词：开放组培 ；抑生素 中图分类号：$628 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—2324(2004)04—0529—5 THE PRELⅡ INARY rUDY o PLAN’rOPEN —TISSUE —CULTURE CUIGang，SHANWen—xiu，QINXu，SUNZhong—XH‘ (1．CollegeofHorticultureScienceandEn~neefing，ShandongAgricultureUniversity，Talan271018，China； 2．AgrlcdturalDepartmentofShandongProvince，Jinan250014．China) Abstract：111epurposeoftheexperimentwastosetupanopen—tissue—culturemode，SOthattheplanttissueculture couldbeoperatedinthenatural，opensurroundinginsteadofseverelyasepticenvironment．Asaresult，thestepsof tissueculturecouldbesimplifiedradicallyandthecostcouldbereducedgreatly．Experimentalresultsshowedthat，by usingplantioticsinsteadofinoculatingtablena dautoclave，thecontaminationratecouldbekeptintheacceptablelever under10％ na dtheresuedoftissueculture couldnotbeinfluenced． KeyW ords：open—tissue—culture，plantiotics 1 引言 植物组织培养是本世纪初开始，以植物生理学为基础发展起来 的一项植 物繁殖技术 。经过近一个世 纪的发展 。植物组培技术以其独特的优势 ，己在科学研究和生产上得到广泛应用 ，发展至今，它的理论研究 己相当精深 ，但它的技术环节还存在不少问题。传统组培过程繁杂的技术环节，都是围绕防止污染而制定 的，控制污染成了组培中的首要技术，不能把污染率降低到可以接受的范 围，也就意味着这项工艺不能进 行下去。而影响污染的因素多种多样 ，~nPl-植体的种类 、取材的季节、时间、预处理方法、消毒药剂的种类 、 浓度、消毒时间以及消毒方法、培养基和器皿灭茵、操作人员、工作环境的要求、超净工作台的工作质量等 都与污染密切相关 ，因此 ，使得污染问题十分复杂 ，也很难防治 ，成为限制组培产业化的重要原因之一。 众所周知，组培过程中的污染，主要表现为培养基的污染，营养丰富的培养基为细菌、真菌提供了适宜 的滋生场所 。因此 ，只要将培养基改造成即保证植物组织正常生长，又具有杀菌、抗菌功能的培养基 ，菌类 一 旦失去滋生场所 ，就不会对组培过程造成危害。解决了污染 问题 ，使组培过程脱离严格 的无菌环境 ，从 根本上简化组培环节 ，进行开放式组织培养是完全可能的。而改造培养基 的关键是要找到一种能够添加 到培养基