翅果油树愈伤组织的继代培育.pdfVIP

维普资讯 山西师范大学学报 (自然科学版) 第 16卷 第 4期 JournalofShanxiTeacherSUniversity Vo1．16No．4 2002年 12月 NaturalScienceEdition Dec． 2002 文章编 号 ：1009—4490(2002)04—0071—04 翅果油树愈伤组织的继代培养 卢英梅 ， 程小丽 ， 侯娟娟 ， 宋安平 ， 张育盛 (山西师范大学生命科学学院，山西 临汾 041004) 摘要 ：本文对翅果油树 (ElaeagnusmollisDiels)实生苗 的初代培养和愈伤组织 的继代培养及 种 子 的灭菌方法和时间进行 了探索 ．结果表 明：初代培养最佳培养基为 1／2MS(基本培养基 MS 中 的大 量 元 素减 半)．继 代 培 养 中 的最 佳 培 养 基 为 Nz(MS+BAos+NAAo．oz)， N4(M S+ BA05+ NAA004)． 关键词 ：翅果油树 ；组织培养 ；愈伤组织 中图分类号 ：Q948．113 文献标识码 ：A U 弓I舌 翅果油树 (ElaeagnusmollisDiels)属胡颓子科 ，多年生落 叶灌木或乔木 ，现仅分布于 山西 乡宁 、翼城 、河津等地 以及秦岭崂峪沟 ，是我 国特有树种 ，国家二级保护植物．翅果油 树是一种优 良的油料树种 ，种仁含油率高 ，油质好 ，可供食用．医药和工业用 ；鲜 叶可做饲 料，花粉蜜含量大，是一种很好的蜜源植物 ；根系发达 ，富含根瘤菌，能固氮 ，具有较高的经 济价值 ．翅果油树种壳坚硬 ，不易腐烂 ，成熟 的种子约 4O 发育不 良，1O 的受到虫害． 对有性繁殖极为不利 ]． 陈惠等人在 1993年对翅果油树枝条 的组织培养进行过一些研究_l3并初步探索 了种 子的试管培养．本文在此基础上进行了以下研究：(1)翅果油树种子 的试管萌发 ，筛选最佳 灭菌方法和最佳培养基 ；(2)愈伤组织 的诱导、分化及继代培养 ． 1 材料与方法 1．1 试验材料 经过预处理 的当年生乡宁和翼城 的翅果油树种子．处理方法如下 ： (1)处理种皮 ：翅果油种子皮厚不易萌发 ，且剥皮 困难．接种前 需对种皮进行预处理后 再剥皮备用．预处理先后采用三种方法 ：①硫酸渗泡 2小时，流水冲洗 2小时．②物理去皮 即用钳子夹去种子皮．③清水渗泡． 收稿 日期 ；2002—07—24 作者简介 ：卢英梅 (1957一)，女，山西洪洞人 ，山西师范大学生命科学学 院实验师，主要从事植物生 理实验方面 的工作． 维普资讯 72 山西师范大学学报 (自然科学版) 2002正 (2)去外皮 、中皮 ，用洗衣粉水清洗 ，清水冲净备用． 1．2 实验 方法 1．2．1 种子灭菌方法 将预处理剥皮后 的翅 果树油种子于超净工作 台上先用 7O 酒精 以不 同时 间浸 泡灭 菌 ，浸泡 时 间分别 为 5min，6min，7min，8min，9min，10rain，1lmin， 12min，13min，15min，20min，后用无菌水冲洗 一次 ，再用 1／1000升汞灭菌 10min，无菌水 冲洗 4次～6次 ，选 出酒精的最佳灭菌 时间． 1．2．2 初代培养 初代培养所选培养基 ：①改 良的MS。，亦即 1／2MS。(基本培养基 中大 量元素减半)；②水分+凝 固剂 (蒸馏水+琼脂 )． 在超净工作 台上 ，将灭 了菌 的种子接到初代培养基① 、②上 ，在光照强度为 950Lux一 1000IUX，光照时间为 12h／d，温度 23C±2C，湿度 4O 左右 的培养室 内培养__4]．观察记 录发芽率及生长情况．选 出最佳培养基和培养时 间． 1．2．3 愈伤组织的诱导、分化 、培养 在超净工作 台上 ，选择健康 的初代培养的实生苗作 为外植体材料诱 导愈伤组织 ，培养基为 N (MS+BA。．+NA