γ氨基丁酸经由细胞微丝骨架对拟南芥气孔开闭的负调控.pdfVIP

第 31卷第4期 中南民族大学学报 (自然科学版) V0J．31No．4 2012年 12月 JournalofSouth-CentralUniversityforNationalities(Nat．Sci．Edition) DeC．2012 一 氨基丁酸经 由细胞微丝骨架 对拟南芥气孑L开闭的负调控 程旺元，赵 丽，龚汉雨，覃永华，余光辉 (中南民族大学 生命科学学院，武汉 430074) 摘 要 为研究y一氨基丁酸(GABA)信号在气孔开闭中的作用 ，将标记微丝的质粒35S—talin-GFP导入 LBA4404农 杆菌中，用浸花法转化哥伦比生态型(Columbiaphenotype)拟南芥．通过卡那霉素抗性筛选，分别筛选到5个抗性株 系．对 T：代转基因幼苗根的荧光观察 ，证实了抗性株系均为转基因植株，在根的分生组织、伸长区、成熟区和气孔 保卫细胞处都有较强的荧光表达．将 GFP标记细胞骨架的转基因植株的叶片下表皮放在气孔张开液中充分反应2 h，98％的气孔已经完全张开；将完全张开的气孔转移到含有 1mMGABA的溶液反应30min，80％左右的气孔逐渐 关闭，说明GABA信号是引起拟南芥气孔关闭的诱导因素，GABA能显著降低气孔开度，该信号促进气孔关闭是一 个快速反应的过程． 关键词 一氨基丁酸；保卫细胞 ；气孔；拟南芥 中图分类号 Q943．1 文献标识码 A 文章编号 1672-4321(2012)04-0041424 NegativeRegulationofv-aminobutyrieacid(GABA)onArabidopsis StomaOpeningandClosureviatheDynamicFilamentActin ChengWangyuan，ZhaoLi，GongHanyu，QinYonghua，YuGuanghui (CollegeofLifeSciences，South-CentralUniversityforNationalities，Wuhan430074，China) Abstract Toinvestigatetheroleof -aminobutyricacid(GABA)signalinthestomaticopeningandclosingprocess， microfilamenttaggedplasmid35S—talin—GFPwasimportedintoLB4404AgrobacteriumtotransformArabidopsis(Columbia phenotype)byflower-dippingmethod．Fiveresistantlineswerescreenedbykanamycinresistanceselection．Transgenic seedlingsofT2generationwereobservedbyfluorescencestereomicroscopyand theirtransgenicresistancewasconfimr ed． Observationshowedthatfluorescencewasstronglyexpressedinrootmeristem，elongationandmaturezone，stomaticguard cells．Lowerepidemr isofthetransgenicleavesofGFP-taggedcytoskeletonweresoakedinstomaticopeningsolutionfor2h， 98％ ofthestomatawerefullyopened．However，whenthefullyopenedstomatawastransferredtoasolutioncontaining1 mmol／LGABA for30min，about80％ ofthestomatagraduallyclosed．Itwasconcludedthat