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第36卷第1期 浙江师范大学学报(自然科学版) v01.36,No.1
2013年2月 Journalof Normal Feb.’2013
Zhejiang University(Nat.sci.)
文章编号:1001-5051(2013)01-0101-07
重组Nkx2.5腺病毒的构建及
心肌细胞感染实验
张 勤, 应湾湾, 葛丹婷, 房跃群, 李 涛
(浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华321004)
pAdTtrackcmv-Nkx2.5经Pme
心肌细胞,检测了Nkx2.5蛋白表达及对下游ANF和p-M/tO基因的表达调控;并采用感染病毒的H9c2心肌
细胞经H:0:处理建立细胞凋亡模型,采用噻唑蓝法和荧光染色法检测了细胞存活率和凋亡细胞的形态变
化.结果显示,Nkx2.5过表达能抑制H:O:诱导的H9c2细胞凋亡.
关键词:Nkx2.5;重组腺病毒;心肌细胞;H9c2细胞;凋亡
中图分类号:Q789 文献标识码:A
ConstructionofrecombinantadenovirusNkx2.5and
in cells
itsinfection
myocardial
ZHANGYING GE FANG Tao
Qin。 Wanwan。Danting。 Yuequn-LI
Normal 321004,China)
(CollegeofChemistryand啦Science.ZhejiangUniversityI^nhuaZhejiang
Abstract:The wasusedtocreaterecombinantadenovirus Nkx2.5
system expressinggene.Nkx2.5
AdEasy
waslinearizedPme
wasclonedinto I
gene pAdTrackcmv.ThepAdTrackcmv—Nkx2.5plasmid by digestion,
andthentransformedintoE.coli wastransfect—
BJ5183containingpAdEasy一1.ThepAdEsay—Nkx2.5plasmid
ratcar·
edinto293A cellsto recombinantadenovirusAd—Nkx2.5.Helacellsandneonatal
packagingproduce
toassessNkx2.5 anditsfunctionon
diac wereinfectedwithadenovirusAd—Nkx2.5 expression regu-
myocytes
downstream asANF cellsafterinfectionwithaden
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