重组Nkx25腺病毒的构建及心肌细胞感染实验.pdfVIP

重组Nkx25腺病毒的构建及心肌细胞感染实验.pdf

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第36卷第1期 浙江师范大学学报(自然科学版) v01.36,No.1 2013年2月 Journalof Normal Feb.’2013 Zhejiang University(Nat.sci.) 文章编号:1001-5051(2013)01-0101-07 重组Nkx2.5腺病毒的构建及 心肌细胞感染实验 张 勤, 应湾湾, 葛丹婷, 房跃群, 李 涛 (浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华321004) pAdTtrackcmv-Nkx2.5经Pme 心肌细胞,检测了Nkx2.5蛋白表达及对下游ANF和p-M/tO基因的表达调控;并采用感染病毒的H9c2心肌 细胞经H:0:处理建立细胞凋亡模型,采用噻唑蓝法和荧光染色法检测了细胞存活率和凋亡细胞的形态变 化.结果显示,Nkx2.5过表达能抑制H:O:诱导的H9c2细胞凋亡. 关键词:Nkx2.5;重组腺病毒;心肌细胞;H9c2细胞;凋亡 中图分类号:Q789 文献标识码:A ConstructionofrecombinantadenovirusNkx2.5and in cells itsinfection myocardial ZHANGYING GE FANG Tao Qin。 Wanwan。Danting。 Yuequn-LI Normal 321004,China) (CollegeofChemistryand啦Science.ZhejiangUniversityI^nhuaZhejiang Abstract:The wasusedtocreaterecombinantadenovirus Nkx2.5 system expressinggene.Nkx2.5 AdEasy waslinearizedPme wasclonedinto I gene pAdTrackcmv.ThepAdTrackcmv—Nkx2.5plasmid by digestion, andthentransformedintoE.coli wastransfect— BJ5183containingpAdEasy一1.ThepAdEsay—Nkx2.5plasmid ratcar· edinto293A cellsto recombinantadenovirusAd—Nkx2.5.Helacellsandneonatal packagingproduce toassessNkx2.5 anditsfunctionon diac wereinfectedwithadenovirusAd—Nkx2.5 expression regu- myocytes downstream asANF cellsafterinfectionwithaden

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