10羟基喜树碱衍生物的合成及其抗肿瘤活性的初步研究.pdfVIP

浙江理工大学学报，第30卷，第5期，2013年9月 of Sci—Tech Journal Zhejiang University V01．30，No．5，Sept．2013 文章编号：1673—3851(2013)05—0742—05 10．羟基喜树碱衍生物的合成及其 抗肿瘤活性的初步研究 陈文铎8，黄越8，董淼8，许韶威8，周炜8，唐斌6，徐涛8 (浙江理工大学，a．生物工程研究所；b．新元医学与生物技术研究所，杭州310018) 摘要：为提高10一羟基喜树碱在水中溶解性和稳定性，将其与丁二酸酐经酯化合成喜树碱衍生物一lo，20(S)一 。二琥珀酰羟基喜树碱，所得衍生物经核磁共振氢谱表征，并用水浴搅拌法测定衍生物溶解度。采用h仉vr比色法 检测衍生物对结肠癌细胞sw480的生长抑制，DNA片段化分析和Hoechst33342染色检测其对结肠癌细胞株凋亡 的影响。结果表明，衍生物在水中的溶解度(25℃)为2．3mg，比10一羟基喜树碱高21．8倍；肿瘤细胞的生长抑制作 用呈剂量／时间依赖性，其半数抑制浓度(酝。值)为700nM；而琼脂糖凝胶电泳检测到典型的DNA梯状图谱，Ho— echst 33342染色表明喜树碱类衍生物可诱导细胞凋亡。 关键词：10一羟基喜树碱；10，20(S)一。二琥珀酰羟基喜树碱；水溶解度；凋亡 中图分类号：R979．19 文献标志码：A 等[7]发现，喜树碱内酯环羟基简单酯化后，其活性形 0 引 言 式在人和鼠血浆内的生物半衰期大大延长，喜树碱 内酯环的稳定性增加，而其细胞毒性也同时降低。 10一羟基喜树碱(10—Hydroxycamptothecin， 目前已经有一系列的内酯环羟基酯化产物被报道出 HCPT)是从我国特有植物喜树(已mp￡o旃Pc口口fM— mi咒n把)的果实中提取得到的天然生物碱[1]，能够抑来，但该类酯化产物在体内并不稳定，易受体内内环 制多种肿瘤细胞生长，属于DNA拓扑异构酶I境影响。研究发现丁二酸酯键在体内环境相对稳 (TopoI)的抑制剂[2]，是研究最深入的喜树碱衍生定，并广泛的应用于前体药物的合成[8]。本研究利 物之一。目前应用于临床的10一羟基喜树碱衍生物 用丁二酸酐与10-羟基喜树碱的20位、10位羟基酯 主要有拓扑替康(Topotecan)和7一乙基一10一羟基喜 树碱等‘3|。 10一羟基喜树碱的水溶性极差，生物利用度较 10_羟基喜树碱衍生物，合成路线见图1。测定DSH 低[4|。研究表明，当pH5时，10一羟基喜树碱以内在水中溶解度的变化，并用细胞实验测定衍生物对结 酯环的形式存在；pH7．5时，10一羟基喜树碱以羧肠癌细胞SW480的生长抑制和诱导凋亡作用。 酸盐的形式存在，其羧酸盐形式的生物学活性只有 1材料、仪器与方法 内酯环形式的十分之一[5]，并且发现1o一羟基喜树碱 引发的不良反应如呕吐、恶心、迟发性腹泻与其羧酸 1．1材料 盐形式的存在有很大关系。因此维持10一羟基喜树 10一羟基喜树碱、丁二酸酐、4一二甲氨基吡啶 碱内酯环的稳定性、增加药物溶解度、降低药物毒性 目)购自上海生工生物工程有限公司；薄层层析板 是10一羟基喜树碱衍生物的主要研究方向[6]。Cao 收稿日期：2012—12—10 基金项目：国家自然基金资助项目 作者简介：陈文铎(1988一)，男，河南邓州人，硕士研究生，主要研究天然药物生物技术、中药化学。 通信作者：徐涛，电子信箱：pkuxt@yahoo．co札cn 万方数据 第5期 陈文铎等：10一羟基喜树碱衍生物的合成及其抗肿瘤活性的初步研究 743